ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В КОРНЕВИЩЕ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО (BERGENIA CRASSIFOLIA (L. )FRITSCH. ), КУЛЬТИВИРУЕМОГО В КУЗБАССКОМ БОТАНИЧЕСКОМ САДУ ИНСТИТУТА ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА СО РАН

I Международный конкурс научно-исследовательских и творческих работ учащихся
Старт в науке

ОПРЕДЕЛЕНИЕ ДУБИЛЬНЫХ ВЕЩЕСТВ В КОРНЕВИЩЕ БАДАНА ТОЛСТОЛИСТНОГО (BERGENIA CRASSIFOLIA (L. )FRITSCH. ), КУЛЬТИВИРУЕМОГО В КУЗБАССКОМ БОТАНИЧЕСКОМ САДУ ИНСТИТУТА ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА СО РАН

Мальцев М.Д. 1
1Муниципального бюджетного образовательного учреждения «Средняя общеобразовательная школа №19» г. Кемерово
Автор работы награжден дипломом победителя III степени
Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке "Файлы работы" в формате PDF
Оглавление
 

Введение

3

I

БАДАН ТОЛСТОЛИСТНЫЙ (Bergeniacrassifolia(L.)Fritsch.)

5

1

Ботаническое описание.

5

2

Распространение и экология в Кемеровской области

6

3

Оценка перспективности выращивания Bergeniacrassifolia (L.) Fritsch. в культуре

7

4

Состав биологически активных соединений корневища бадана толстолистного

8

II

Дубильные вещества растительного происхождения

9

1

Строение и свойства растительных дубильных веществ

9

2

Методы анализа растительных дубильных веществ

11

III

Экспериментальная часть

12

IV

Обсуждение результатов

16

 

Заключение

20

 

Литература

21

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы. Известно, что дубильные вещества растительного происхождения находят широкое применение в медицине. Исследования последних лет показали, что эта группа природных соединений обладает более чем 20 видами фармакологической активности. Кроме широко известного вяжущего, противовоспалительного, антибактериального и кровеостанавливающего действия, изучаются противовирусная, противоопухолевая и антимутагенная активность [3,8].

Бадан толстолистный(Bergeniacrassifolia (L.)Fritsch.), семейства камнеломковых (Saxifragaceae) – многолетнее травянистое вечнозеленое растение с длинным, мощным горизонтальным корневищем (рис.1). В официальной медицине используют корневища бадана, которые содержат дубильные вещества, как гидролизуемого, так и конденсированного типа [1].

Рисунок 1. Бадан толстолистный (Bergenia crassifolia L.)

 

Водный отвар корневища бадана применяется как вяжущее, противовоспалительное, кровеостанавливающее средство при лечении желудочно-кишечных заболеваний. В народной медицине используются как корневища, так и листья бадана. Кроме дубильных веществ, бадан содержит другие полезные биологически активные вещества – арбутин, гидрохинон, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды, изокумарины и др. [3,8].

Таким образом, бадан толстолистный является ценным лекарственным растением и находит широкое применение в медицине в виде лекарственного сырья для получения фитопрепаратов.

На территории Кемеровской области бадан произрастает в высокогорных лесах, в субальпийском подпоясе и поясе горных тундр Кузнецкого Алатау и Горной Шории. Растет по крутым каменистым склонам и курумникам, образуя довольно большие заросли. На территории области можно заготавливать до 178 т. корневищ бадана ежегодно [4].

В связи с тем, что бадан произрастает в удаленных, труднодоступных местах, а многие заросли расположены на территории заповедника «Кузнецкий Алатау» и Государственного природного национального парка «Шорский», заготовка сырья затруднена. Поэтому в 2009 г. на территории Кузбасского ботанического сада ИЭЧ СО РАН были начаты опыты по интродукции и биохимическому изучению Bergeniacrassifolia (L.) Fritsch.

Целью настоящей работы являлось качественное и количественное определение дубильных веществ в корневищах Bergeniacrassifolia(L.)Fritsch.,культивируемого на территории Кузбасского ботанического сада.

Исходя из этого, нами были поставлены следующие задачи:

  1. Изучить литературные источники.

  2. Изучить методы качественного и количественного анализа дубильных веществ.

  3. Выделить дубильные вещества из корневища бадана, культивированного на территории Кузбасского ботанического сада.

  4. Провести качественный и количественный анализ дубильных веществ в полученных извлечениях физико-химическими и химическими методами.

  5. Провести сравнительный анализ с извлечениями, полученными из аптечного лекарственного сырья.

Гипотеза мы предполагаем, что лекарственное растительное сырье – корневища бадана толстолистного – полученное в результате культивирования в условиях Кузбасского ботанического сада, не будет отличаться по качественному и количественному составу от аптечного сырья, и позволит избежать заготовки этого ценного сырья в природоохранных зонах Кемеровской области.

Объектами исследования являлись, собранные в летний период 2015 года, освобожденные от земли, вымытые и высушенные корневища Bergeniacrassifolia(L.) Fritsch., а также лекарственное сырье – «Корневища бадана», приобретенное в аптечной сети г. Кемерово («Иван-Чай», серия 010914).

  1. БАДАН ТОЛСТОЛИСТНЫЙ (Bergeniacrassifolia(L.)Fritsch.)

  1. Ботаническое описание

Бадан толстолистный (Bergeniacrassifolia(L.)Fritsch.), назван в честь немецкого ботаника Карла Августа фон Бергена (Karl August von Bergen, 1704 - 1759). Многолетнее травянистое растение из семейства камнеломковых – Saxifragaceae (рис.2) .

Рисунок 2. Общий вид растения

 

Высотой 20-50 см с толстым, ползучим, мясистым, сильно разветвленным корневищем длиной от 1,5 до 3 метров и толщиной от 0,5 до 4 см. Корневище сверху темно-коричневое, с многочисленными рубчиками – следами прикрепления розеточных листьев, расположенное близ поверхности почвы, переходящее в мощный вертикальный корень. На изломе – светло-розовое, быстро темнеющее на воздухе.

Укороченный надземный побег имеет на верхушке розетку цельных, голых, кожистых, зимующих листьев, с закругленным, серцевидным или клиновидным основанием, длиной около 10-20 см, шириной 9-17 см, длиннее черешка. На нижней стороне отчетливо видны точечные железки. К осени листья краснеют, зимой не опадают, сохраняясь в почерневшем виде до 2-3 лет.

Стебель безлистный, красновато красный, несущий крупное раскидистое соцветие. Цветки мелкие, правильные, пятичленные, без прицветников, в верхушечном густом метельчато-щитковидном соцветии (рис. 3), обыкновенно по два на длинных красноватых безлистных цветоножках длиной до 4 см.

Рисунок 3. Соцветие бадана

 

Чашечка колокольчатая, голая, до половины рассечённая на пять овальных, наверху закруглённых долей длиной до 4 мм; лепестки обратнояйцевидные или широко-яйцевидные, с широким коротким ноготком, длиной 10-12 мм, шириной 6-8 мм, с тупо-округлой верхушкой и многими жилками, лилово-красные или розовые. Тычинки вдвое длиннее чашечки, их десять. Пестик с полунижней завязью, глубоко разделённый на два (три) столбика с широкими почковидными рыльцами.

Плод – эллипсоидальная, сухая коробочка с двумя расходящимися лопастями, раскрывающимися по брюшному шву. Семена многочисленные, продолговатые, гладкие, голые, гранистые, почти чёрные, длиной до 2 мм.

Цветёт в мае-июне до появления молодых листьев, семена созревают в июле-августе.В основном размножается вегетативно (отрезками корневищ), но не исключено и размножение семенами.

  1. Распространение и экология в Кемеровской области

Бадан толстолистный относится к экологической группе растений мезопетрофитов. Растет в лесном субальпийском и альпийском поясах на высоте от 300 до 2000 м над уровнем моря. Приурочен к хорошо дренированным каменистым почвам, крупно глыбовым осыпям и россыпям, скалам и древним моренам. Чаще всего растет по склонам северных и северно-восточных экспозиций, встречается в редких лесах по падям и долинам рек.

Растет бадан также на гарях в березово-осиновых лесах. Наиболее широко распространен и обилен в темно-хвойных лесах верхней половины лесного пояса, особенно близ границы леса, в так называемых бадановых типах леса. Нередко в этих условиях он образует сплошные заросли.

На территории Кемеровской области бадан произрастает в высокогорных лесах, в субальпийском подпоясе и поясе горных тундр Кузнецкого Алатау и Горной Шории. Растет по крутым каменистым склонам и курумникам, образуя довольно большие заросли [3]. На территории области можно заготавливать до 178 т. корневищ бадана ежегодно [4]. Сырье можно убирать, начиная с третьего года культуры, продолжительность эксплуатации плантации 8-10 лет и дольше [10].

  1. Оценка перспективности выращивания Bergeniacrassifolia(L.) Fritsch. в культуре

В связи с тем, что бадан произрастает в удаленных, труднодоступных местах, а многие заросли расположены на территории заповедника «Кузнецкий Алатау» и Государственного природного национального парка «Шорский», заготовка сырья затруднена. Поэтому в 2009 г. на территории Кузбасского ботанического сада ИЭЧ СО РАН были начаты опыты по интродукции и биохимическому изучению Bergeniacrassifolia (L.) Fritsch. Для установления особенностей сезонного роста и развития растений и накопления данных, характеризующих устойчивость в новых условиях при интродукции, проводились фенологические наблюдения.

Опыт был заложен на опытном участке «Аптекарского огорода», который расположен на южной стороне Ботанического сада. Условия микроклимата на данной территории формирует протекающая рядом река Томь.

Почва участка представлена тяжелыми высокогумосовыми суглинками (гумус 9,9 %), характеризующимися кислой реакцией почвенного раствора (рН водной вытяжки 6,1), низкой обеспеченностью фосфором (70 мг/кг), средним содержанием обменного калия (85 мг/кг). Содержание общего азота - 0,41 %. Почва характеризуются низкой воздухоёмкостью и водопроницаемостью, что нередко является причиной ее переувлажнения. Поэтому при подготовке почвы к посадке в нее добавлялся крупный песок.

Рисунок 4. Опытный участок с баданом

на территории Кузбасского ботанического сада

(июнь 2015 г).

В качестве посадочного материала использовались растения, взятые из коллекции Ботанического сада, привезенные из экспедиции по Горной Шории. Для ускоренного получения растительного сырья использовали вегетативный способ размножения отрезками корневищ длиной 5-8 см на которых имелось не менее трех спящих почек и 2-3 верхних листа. Под посадку были подготовлены грядки прямоугольной формы, с выровненной мелкокомковатой поверхностью. Высаживали посадочный материал в середине августа в борозды на глубину не более 3-5 см от поверхности почвы, при площади питания 30-40 х 50-60 см.

Уход за посадками осуществляли в соответствии с рассадной культурой. На второй и последующие годы вегетации при отрастании проводили периодическое рыхление междурядий и прополку сорняков. В засушливый период проводился полив растений.

Первичные опыты по интродукции показали целесообразность выращивания бадана в культуре с целью получения лекарственного растительного сырья. В ходе наблюдений было установлено, что Bergeniacrassifolia(L.) устойчива и неприхотлива в культуре, состояние надземной массы отличное. В зависимости от погодных условий цветет с мая по июнь месяц, плодоношение наступает в июле. Бадан проявил достаточную устойчивость к экстремальным условиям резко-континентального климата лесостепной зоны Западной Сибири, а также к вредителям и болезням [2].

Таким образом, бадан толстолистный может рассматриваться в качестве потенциального продуцента растительных ресурсов, расширяющих ресурсную базу региона. Однако, необходимо оценить качество сырья от культивируемого растения на соответствие требованиям Государственного стандарта на сырье «Бадана толстолистного корневища» [7].

  1. Состав биологически активных соединений корневища бадана толстолистного

Бадан относится к растениям-накопителям дубильных веществ. Довольно в больших количествах дубильные вещества содержатся в корневищах от 15 до 30%. В основном они относятся к группе галлотанинов (около 10%). С возрастом содержание дубильных веществ в корневищах увеличивается. Корневища содержат также изокумарин бергенин 5%, углеводы около 3%, простые фенолы – арбутин, гидрохинон, рододендрин – до 9%, фенолкарбоновые кислоты, флавоноиды, эфирное масло до 0,02% [1,3,8].

В листьях содержится от 10 до 23 %, в отдельных случаях до 35 % таннидов (с возрастом содержание дубильных веществ в листьях уменьшается). Танниды листьев – смесь пирогалловых (до 40 %) и пирокатехиновых таннидов [8].

Содержание арбутина в зеленых листьях достигает 22 %, а свободного гидрохинона – 4 %, присутствует также галловая и эллаговая кислоты. По содержанию арбутина бадан является самым богатым в мире растительным источником. До изучения бадана первое место принадлежало толокнянке (5 % арбутина).

  1. ДУБИЛЬНЫЕ ВЕЩЕСТВАРАСТИТЕЛЬНОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ.

  1. Строение и свойства растительных дубильных веществ

Дубильные вещества (танниды) это растительные высокомолекулярные фенольные соединения с молекулярной массой 300-5000, иногда до 20000 дальтон. Они способны осаждать белки, алкалоиды и обладают вяжущим вкусом.

Согласно классификации К. Фрейденберга [9], дубильные вещества подразделяют на:

  1. Гидролизуемые, которые в условиях кислотного или ферментного гидролиза распадаются на простые части – галловую кислоту и углеводы. К ним относятся галлотаннины, эллаготаннины и др. Строение этой группы дубильных веществ изображено на рис.5.

  2. Конденсированные, которые в кислой среде не гидролизуются, а образуют продукты конденсации – флобафены. Эта группа дубильных веществ являются производными катехинов и лейкоантоцианидинов. Строение данной группы дубильных веществ, приведено на рисунке 6.

 

Рисунок 5 . Строение дубильных веществ гидролизуемого типа

 

Рисунок 6. Строение дубильных веществ конденсированного типа

Таким образом, дубильные вещества – это смесь различных полифенолов, имеющих нередко сложную структуру, и очень нестабильный состав, поэтому выделение и анализ индивидуальных компонентов представляет собой сложную задачу.

Дубильные вещества – это аморфные вещества желтого или бурого цвета, растворимые в воде, спирте, ацетоне, пиридине, бутаноле, этилацетате и нерастворимые в хлороформе, бензоле, диэтиловом эфире и других неполярных растворителях.

При выделении из растительного материала суммы дубильных веществ используют экстракцию горячей водой. Если необходимо получить индивидуальные фракции, то охлажденное водное извлечение последовательно экстрагируют различными неполярными и полярными растворителями.

  1. Методы анализа растительных дубильных веществ

Дубильные вещества в растительном сырье определяют качественными реакциями, которые можно разделить на две группы: реакции осаждения и цветные реакции. Для проведения качественных реакций готовят водное извлечение.

Дубильные вещества осаждаются из водного извлечения 1% раствором желатина, растворами алкалоидов и азотистых оснований (хинин, антипирин и др.). Гидролизуемые дубильные вещества можно осадить из водного извлечения, подкисленного уксусной кислотой, 10% раствором основного ацетата свинца. Конденсированные дубильные вещества осаждаются бромной водой.

При добавлении к водному извлечению солей железа (III), в случае присутствия гидролизуемых дубильных веществ, раствор окрашивается в черно-синий цвет, в присутствии конденсированных дубильных веществ наблюдается черно-зелёное окрашивание. Эта реакция используется для открытия дубильных веществ в растительном материале.

Для идентификации дубильных веществ широко используют метод хроматографии в тонких слоях сорбента [9].

В литературе описано более 100 различных способов количественного определения дубильных веществ, которые можно разделить на следующие основные группы:

  1. Гравиметрические – основанные на количественном осаждении дубильных веществ белками, солями свинца или адсорбции кожным (гольевым) порошком.

  2. Титриметрические – основанные на окислении полифенолов перманганатом калия.

  3. Фотоколориметрические – основанные на цветных реакциях, например с солями окисного железа, фосфорновольфрамовой кислотой, реактивом Фолина-Чокальтеу и др.

  4. Нефелометрические, хромато-спектрофотометрические и др.

В Фармакопее Российской Федерации, которая является основным документом, содержащим Государственные стандарты качества на лекарственное растительное сырье, используется титриметрический метод Левенталя в модификации А.Л. Курсанова, основанный на способности дубильных веществ окисляться перманганатом калия [6].

  1. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Приготовление извлечения из корневища бадана толстолистного. 1г измельченного сырья заливают 100 мл воды. Нагревают на водяной бане 20-30 минут, процеживают через вату, и полученное извлечение используют для проведения качественных реакций [9].

  1. Осаждение раствором желатина. К 2-3 мл извлечения добавляют по каплям 1% раствор желатина. Появляется муть, исчезающая при добавлении избытка реактива.

  2. Реакция с алкалоидами. К 2-3 мл извлечения прибавляют несколько капель 1% раствора хинина сульфата. Появляется аморфный осадок.

  3. Реакция с железоаммонийными квасцами. К 2-3 мл извлечения добавляют 4-5 капель раствора железоаммонийных квасцов. Наблюдают окраску раствора.

  4. Реакция с бромной водой. К 2-3 мл извлечения прибавляют по каплям бромную воду до того момента, когда в жидкости станет ощущаться запах брома. Наблюдают образование осадка.

  5. Реакция с основным ацетатом свинца. К 1 мл извлечения добавляют 2 мл 10% раствора уксусной кислоты и 1 мл 10% раствора основного ацетата свинца. Наблюдают образование осадка.

  6. Реакция с формальдегидом. К 10 мл извлечения прибавляют 5 мл смеси (2 мл хлористоводородной кислоты, разведенной в соотношении 1:1, и 3 мл 40% раствора формальдегида), полученную смесь кипятят 30 минут в колбе с обратным холодильником. При наличии конденсированных дубильных веществ они выпадают в осадок.

  7. Реакция с нитратом натрия. К 2 мл извлечения прибавляют несколько кристаллов нитрата натрия и 2 капли 0,1 М раствора хлористоводородной кислоты. При наличии гидролизуемых дубильных веществ появляется коричневое окрашивание.

Хроматография в тонких слоях сорбента. Около 0,5 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 10 мл спирта 50 %, нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 10 мин. После охлаждения до комнатной температуры полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки размером 10 × 15 см на полимерной подложке со слоем силикагеля наносят 5 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 40 мин смесью растворителей толуол – этилацетат – муравьиная кислота безводная (5:4:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет 10 см от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Хроматограмму обрабатывают раствором для детектирования, состоящим из равных объемов 1% раствора хлорида закисного железа и 1% раствора феррицианида калия.

Определение суммы дубильных веществ в пересчете на танин (ГФ XIII, ОФС.1.5.3.0008.15) [6]. Около 2 г (точная навеска) измельченного лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, просеянного сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, помещают в коническую колбу вместимостью 500 мл, заливают 250 мл нагретой до кипения воды и кипятят с обратным холодильником на электрической плитке с закрытой спиралью в течение 30 мин при периодическом перемешивании. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через вату в мерную колбу вместимостью 250 мл так, чтобы частицы сырья/препарата не попали в колбу, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 25,0 мл полученного водного извлечения помещают в коническую колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-желтого окрашивания.

Параллельно проводят контрольный опыт: в коническую колбу вместимостью 1000 мл помещают 525 мл воды, 25 мл раствора индигосульфокислоты и титруют при постоянном перемешивании калия перманганата раствором 0,02 М до золотисто-желтого окрашивания.

1 мл калия перманганата раствора 0,02 М соответствует 0,004157 г дубильных веществ в пересчете на танин.

Содержание суммы дубильных веществ в пересчете на танин в абсолютно сухом сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где V – объем калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование водного извлечения, мл;

V1  объем калия перманганата раствора 0,02 М, израсходованного на титрование в контрольном опыте, мл;

0,004157 – количество дубильных веществ, соответствующее 1 мл калия перманганата раствора 0,02 М (в пересчете на танин), г;

a – навеска сырья или лекарственного растительного препарата, г;

W – влажность лекарственного растительного сырья или лекарственного растительного препарата, %;

250 – общий объем водного извлечения, мл;

25 – объем водного извлечения, взятого для титрования, мл.

Примечание. Приготовление раствора индигосульфокислоты. 1 г индигокармина растворяют в 25 мл серной кислоты концентрированной, затем прибавляют дополнительно 25 мл серной кислоты концентрированной и разбавляют водой до 1000 мл, осторожно вливая полученный раствор в воду, в мерной колбе вместимостью 1000 мл, перемешивают.

Определение влажности сырья (ГФ XIII, ОФС.1.5.3.0007.15)[5]. Под влажностью понимают потерю в массе при высушивании за счет удаления гигроскопической влаги и летучих веществ, которую определяют в лекарственном растительном сырье при высушивании до постоянной массы.

Аналитическую пробу измельченного высушенного лекарственного растительного сырья перемешивают и берут две навески по 3 - 5 г, взвешенные с погрешностью ± 0,01 г. Каждую навеску высушенного лекарственного растительного сырья помещают в предварительно высушенный до постоянной массы и взвешенный бюкс с крышкой и ставят в сушильный шкаф, нагретый до 100 – 105 °С. При этой же температуре осуществляют высушивание взятых навесок.

Высушивание лекарственного растительного сырья проводят в открытых бюксах вместе со снятыми крышками. При взвешивании бюксы должны быть закрыты. Первое взвешивание охлажденных в эксикаторе анализируемых образцов, представленных корнями, корневищами, проводят через 3 ч.

Высушивание лекарственного растительного сырья проводят до постоянной массы. Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя последовательными взвешиваниями после 30 мин дополнительного высушивания и 30 мин охлаждения в эксикаторе не превышает ±0,01 г. В этом случае имеется в виду влажность воздушно-сухого лекарственного растительного сырья.

При определении абсолютной влажности, значение которой используется в формулах расчета количества действующих веществ в высушенном лекарственном растительном сырье, определение проводят в навесках 1 – 2 г (точная навеска), взятых из аналитической пробы, предназначенной для количественного определения действующих веществ и золы, вышеописанным методом, но при разнице между взвешиваниями, не превышающей ±0,0005 г.

Влажность (W) лекарственного растительного сырья/препарата в процентах вычисляют по формуле:

W=

(m – m1)·100

,

 

m

где m – масса до высушивания, г;

m1 – масса после высушивания, г.

За окончательный результат определения принимают среднее арифметическое трех параллельных определений, вычисленных до десятых долей процента. Допустимое расхождение между результатами двух параллельных определений не должно превышать 0,5 %.

  1. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Сравнивая товароведческие показатели аптечного сырья бадана толстолистного (БА) и сырья заготовленного в Кузбасском ботаническом саду (ББ), мы получили следующие результаты.

По показателю «Описание» оба вида сырья соответствовали требованиям фармакопейной статьи ФС.2.5.0004.15 «Бадана толстолистного корневища» [7].

Цельное сырье (рис.7) представляло собой куски корневищ цилиндрической формы длиной до 20 см, толщиной 1 – 3,5 см, имеющие на поверхности чешуевидные остатки черешков листьев и округлые следы корней. Цвет корневища и чешуй, покрывающих корневище, темно-коричневый или почти черный. На изломе корневище зернистое, светло-розовое или светло-коричневое. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения сильно вяжущий.

Рисунок 7. Цельное сырье бадана толстолистного.

Измельченное сырье это кусочки корневищ и чешуевидных остатков черешков листьев различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. Цвет корневищ в изломе светло-розовый или светло-коричневый, цвет чешуй и пробки темно-коричневый или почти черный. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения сильно вяжущий (рис.8).

1

2

Рисунок 8. Измельченное сырье корневища бадана:

1. Приобретенное в аптечной сети;

2. Заготовленное в Кузбасском ботаническом саду.

Влажность сырья была в пределах нормы (не более 14%) , БА – 4,245±0,25 %, ББ – 3,965±0,07%.

В водных извлечениях, полученных из БА и ББ, проводили качественные реакции. В результате проведенных реакций установлено, что при взаимодействии водных извлечений из сырья с 1% раствором желатина появлялась муть, исчезающая от избытка реактива, с раствором хинина сульфата возникал аморфный осадок. При добавлении раствора железоаммониевых квасцов наблюдалось черно-синее окрашивание и осадок, это свидетельствует о наличии группы гидролизуемых дубильных веществ. При добавлении смеси хлористоводородной кислоты и 40% раствора формальдегида после кипячения образовывался незначительный осадок, что свидетельствует о наличии конденсированных дубильных веществ. При добавлении 10% раствора уксусной кислоты и 10% раствора основного ацетата свинца образуется осадок (гидролизуемые дубильные вещества). О наличии этой же группы дубильных веществ свидетельствует коричневое окрашивание раствора при добавлении натрия нитрата. Результаты исследования приведены в табл.1.

Таблица 1. Результаты проведения качественных реакций.

Реактив

Результат

БА

ББ

1% раствор желатина

Помутнение, исчезающее при добавлении реактива

Помутнение, исчезающее при добавлении реактива

1% раствор хинина сульфата

Аморфный осадок

Аморфный осадок

Раствор железоаммонийных квасцов

Черно-синее окрашивание

Черно-синее окрашивание

Раствор формальдегида

Осадок

Осадок

Раствор основного ацетата свинца

Осадок

Осадок

Натрия нитрат

Бурое окрашивание

Бурое окрашивание

Таким образом, в исследуемых образцах корневища бадана обнаружена смешанная группа дубильных веществ – гидролизуемого и конденсированного типа.

В ходе идентификации спиртовых извлечений БА и ББ методомхроматографии в тонких слоях сорбента (ТСХ) на пластинках с силикагелем «Силуфол» в системе растворителей толуол – этилацетат – муравьиная кислота (5:4:1) обнаружено полное совпадение содержания соединений фенольного и полифенольного характера (рис. 9).

 

БА ББ

 

Рис. 9. Результаты проведения ТСХ спиртовых извлечений БА и ББ.

Далее устанавливали количественное содержание суммы дубильных веществ методом перманганатометрии [6]. Содержание дубильных веществ в БА – 21,06±0,37%, а в образцах ББ – 23,14±0,07%. Фармакопея РФ регламентирует содержание дубильных веществ не менее 20% [7].

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

В результате проведенных исследований установлено, что сырье бадана толстолистного, культивированного на территории Кузбасского ботанического сада, по качественному и количественному содержанию основной группы биологически активных веществ, соответствует требованиям Фармакопеи Российской Федерации. Таким образом, сырье культивированного бадана толстолистного может использоваться в качестве лекарственного сырья и сырья для получения фитопрепаратов. Культивирование бадана позволит избежать заготовки этого ценного сырья в природоохранных зонах Кемеровской области.

Литература

  1. Ботанико-фармакогностический словарь: Справочное пособие / Под ред. К.Ф. Блиновой, Г.П. Яковлева. – М.: Высшая школа, 1990. – 272 с.

  2. Загурская Ю. В., Егорова И. Н.Оценка перспективности выращивания леарственных растений в Кузбасском Ботаническом саду // Вестник Алтайского государственного аграрного университета. 2015. № 12 (134). С. 61-67.

  3. Зеленая аптека Кузбасса/ Г.В. Крылов, Н.Ф. Козакова, Э.В. Степанов. – Кемеровское кн. изд-во,1989. – 334 с.

  4. Егорова И.Н. Содержание тяжелых металлов и радионуклидов в сырьевых лекарственных растениях Кемеровской области: дис.…канд. биол. наук. – Томск, 2010. – 221 с.

  5. ОФС.1.5.3.0007.15 Определение влажности лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов.

  6. ОФС.1.5.3.0008.15 Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах

  7. ФС.2.5.0004.15 Бадана толстолистного корневища.

  8. Растительные ресурсы СССР: Цветковые растения, их химический состав, использование; семейства Hydrangeaceae–Haloragaceae. – Л.: Наука, 1987. – С. 8-10.

  9. Химический анализ лекарственных растений: Учебное пособие для фармацевтических вузов / Под ред. Н.И. Гринкевич, Л.Н. Сафронич. – М.: Высшая школа,1983. – 176 с.

  10. Энциклопедический словарь лекарственных, эфиромасличных и ядовитых растений / Сост. Г.С. Оголевец. – М.:Сельхозгиз,1951. – 584 с.

21

Просмотров работы: 2909