I Международный конкурс научно-исследовательских и творческих работ учащихся

Старт в науке

ИЗУЧЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ, ВХОДЯЩИХ В СОСТАВ ЗМЕЕГОЛОВНИКА ДЛАНЕВИДНОГО – DRACOCEPHALUM PALMATUM, ПРОИЗРАСТАЮЩЕГО В ГОРНОЙ ТУНДРЕ ХРЕБТА САРЫЧЕВА (ОЙМЯКОНСКИЙ РАЙОН РС(Я))

• Авторы
• Руководители
• Файлы работы
• Наградные документы

Бальбуров Э. 1Кондратова А. 1

---

1

Осипова М. 1Чирикова Н.К. 1

---

1

Работа в формате PDF

253.8 KB

Введение 3

I.Теоретическая часть 5

1.1.Лекарственные свойства растений 5

1.2.Биологически активные вещества растений 5

II. Практическая часть 10

2.1.Змееголовник дланевидный – лат.Dracocephalum palmatum 10

2.2.Определение химического состава змееголовника дланевидного, произрастающего на территории Оймяконского района РС (Я) 12

2.3.Сравнение двух видов Dracocephalumпо количеству входящих в их состав фенольных соединений и иридоидов 16

Заключение 18

Литература 20

Приложения 22

Введение

Фитотерапия в Якутии возникла давно и вполне самобытна, о чем свидетельствует наличие многих оригинальных способов лечения, хотя она обогащалась и совершенствовалась под многовековым влиянием медицины других народов. У некоторых растений при их общем сходном характере использования отмечаются некоторые оригинальные области применения, другие растения в качестве лекарственных в народной медицине указываются впервые и не прошли ни химической, ни фармакологической проверки.

Флора Якутии является возможным источником полноценного сырья биологически активных веществ растительного происхождения. В настоящее время спрос учреждений здравоохранения на растительное сырье полностью не удовлетворяется в силу различных объективных причин. Одной из главных причин является малая изученность специфических особенностей лекарственных растений, которые обусловлены своеобразием природных условий региона. Это, прежде всего, особенности химического состава и фармакологических свойств растений Якутии. Кроме того, огромная территория Якутии имеет различные почвенно-климатические условия для произрастания растений, которые способствуют сильной вариации количественного и качественного состава веществ в них. Большой интерес представляет химический состав растений, произрастающих на территории Оймяконья из-за экстремальных условий климата.

Целью исследования является изучение биологически активных веществ надземной части змееголовника дланевидного, произрастающего в Оймяконском районе РС(Я).

Задачи:

1. Поиск, сбор и изучение специализированной литературы, использование Интернет - ресурсов и других источников информации.

2. Организация экспедиции на места произрастания змееголовника дланевидного с целью сбора и дальнейшего изучения растения.

3. Проведение практической работы по изучению химического состава данного растения и доказательства его лечебных свойств.

4. Сравнение количественного состава змееголовника дланевидного (Dracocephalumpalmatum) и змееголовника молдавского (Dracocephalummoldavica).

Новизна. Исследование змееголовника дланевидного впервые проводится учащимися п. Усть-Неры на территории Оймяконского улуса. Это растение мало изучено.

Объектом исследования является лекарственное растение Оймяконского района – змееголовник дланевидный (лат.Dracocephalum palmatum) -, прорастающее в окрестностях р. Агаякан и хребта Сарычева (Тас-Кыстабыт).

Теоретическое значение. Если результаты исследовательской работы будут отвечать нашим ожиданиям (в состав растения будут входить биологически активные вещества, и его лекарственные свойства подтвердятся), может появиться возможность посредством змееголовника дланевидного дополнить официальный список фармакопейных растений.

Практическое значение. Изучение химического состава змееголовника дланевидного, произрастающего вблизи п. Усть-Нера, может дать нам возможность получить доступное, распространенное и высокоэффективное лекарственное средство. Растение достаточно легко собрать, и из него также легко получить различные настои, отвары и чай, которые обладают целебными свойствами.

Для решения поставленных задач нами использовались следующие методы исследования: сбор, изучение и анализ научных работ по теме исследования, методы качественного и количественного анализов на содержание групп соединений и их количества, методика проведения анализа на определение химического состава лекарственного растения.

I.Теоретическая часть

1.1.Лекарственные свойства растений

Одним из путей направленного поиска новых высокоэффективных средств среди растительных веществ является систематическое изучение опыта народной медицины, состава и фармакологической активности применяемых ею лечебных фитопрепаратов, выделение и исследование компонентов, входящих в их состав. В настоящее время усилия многих опытных специалистов-фармакологов направлены на изучение растительного мира с целью создания новых более эффективных лекарственных препаратов.

Фитотерапия или лечение травами – самая древняя и самая молодая наука, которая сочетает в себе тысячелетний опыт древней традиционной и народной медицины разных стран с достижениями современной медицины. Ее еще называют «кладовой здоровья» или богатейшим многовековым опытом.

Жизнь человека теснейшим образом связана с растительным миром. В ходе своего эволюционного развития организм человека надежно приспосабливался к белкам, углеводам, жирам и самым разнообразным биологически активным веществам растительного происхождения, без которых невозможно нормальное течение жизненных процессов и развитие организма в целом. В результате такого симбиоза одни растения стали со временем служить пищей, другие – лекарством.

1.2.Биологически активные вещества растений

Биологически активные вещества (БАВ) представляют собой химические вещества, обладающие высокой физиологической активностью при небольших концентрациях. По отношению к определенным группам живых организмов или к отдельным группам их клеток БАВ оказывают на человеческий или животный организм те или иные воздействия, обеспечивая два процесса – ассимиляцию и диссимиляцию, в основе которых лежит обмен веществ¹. Кроме эффективного лечебного действия, БАВ оказывают на организм также профилактическое действие.

Количество БАВ в растении зависит от его вида, условий произрастания, времени сбора, способа сушки и т.д².

Лекарственные свойства растений определяются содержанием БАВ: эфирных масел, органических и неорганических кислот, фитонцидов, фенолов, полифенолов и т.д³. (Таблица 4). Чтобы доказать, что змееголовник дланевидный является лекарственным растением, нам необходимо проверить входят ли в его состав БАВ. Для этого достаточно определить наличие в составе растения хотя бы отдельных составляющих БАВ: иридоидов, фенольных соединений, катехинов и тритерпенов.

1. Иридоиды.

Иридоиды (псевдоиндиканы) – группа циклопентан-пирановых монотерпенов.

Название иридоиды связано с иридодиалем, который был получен из муравьев рода Iridomyrmex. Иридоиды также называют псевдоиндиканами, благодаря их способности образовать синюю окраску в кислой среде. Горечи – производные иридоидов подразделяют, по крайней мере, на:

а) собственно иридоиды (например, логанин);

б) секо-иридоиды – иридоиды с раскрытым кольцом циклопентана (например, секологанин, сверозид).

В отдельные группы выделяют:

- сесквитерпеноидные горечи, представленные преимущественно лактонами гвайянового ряда (например, артабсин, ахиллин);

- иридоиды в семействе Валериановых, которые представлены валепотриатами (например, валерозидат).

Логанин Секологанин Артабсин Валерозидат

В природе большинство иридоидов встречается в виде гликозидов, некоторые — как свободные компоненты. Являются летучими компонентами эфирных масел, алкалоидами, составляют неаминную часть комплексных индольных алкалоидов и др.

2. Фенольные соединения.

Фенольные соединения - это вещества ароматической природы, которые содержат одну или несколько гидроксильных групп, связанных с атомами углерода ароматического ядра. По числу OH-групп различают одноатомные (например, сам фенол), двухатомные (пирокатехин, резорцин, гидрохинон) и многоатомные (пирогаллол, флороглюцин и др.) фенольные соединения.

Фенольные соединения могут быть в виде мономеров, димеров, олигомеров и полимеров, в основу классификации природных фенолов положен биогенетический принцип. В соответствии с современными представлениями о биосинтезе их можно разбить на несколько основных групп:

• соединения С6-ряда — простые фенолы;

• соединения С6 — С1-ряда — производные бензойной кислоты (фенольные кислоты);

• соединения С6 — С2-ряда — фенолоспирты и фенилуксусные кислоты;

• соединения С6 — С3-ряда — производные фенилпропана (оксикоричные кислоты и спирты, кумарины);

• соединения С6 — С3 — С6-ряда — флавоноиды и изофлавоноиды;

• соединения С6 — С3 — С3 — C6-ряда — лигнаны;

• производные антрацена;

• полимерные фенольные соединения — лигнин, танниды, меланины.

Фенольные соединения наиболее распространены и свойственны каждому растению и даже каждой растительной клетке.

Фенольные соединения играют важную роль в фотосинтезе. Они используются растениями как энергетический материал для разнообразных процессов жизнедеятельности, являются регуляторами роста, развития и репродукции, оказывая при этом стимулирующее воздействие. Известна также антиоксидантная активность многих фенолов.

Фенольные соединения вступают в реакции в сочетании с диазониевыми соединениями. При этом образуются продукты с разнообразной окраской, которые часто используются в аналитической практике.

3. Дубильные вещества.

Дубильные вещества – это высокомолекулярные фенольные соединения, которые наделены вяжущими и дубящими свойствами, и довольно широко распространены в мире растений. Они характеризуются особым вяжущим вкусом. Дубильные вещества оказывают влияние на органическую среду и устраняют влияние микроорганизмов.

Катехины — органические вещества из группы флавоноидов, которые входят в состав дубильных веществ многих растений. Они представляют собой полифенольные соединения и являются сильными антиоксидантами. Катехины - бесцветные кристаллические вещества, часто обладающие горьковато-вяжущим вкусом, хорошо растворимы в воде и спирте.

Характерные представители — катехин и эпикатехин, являющиеся стереоизомерами (их строение показано приведённой формулой):

В чистом виде катехины применяются редко. Однако редокс-превращения катехинов играют важную роль в технологии многих пищевых производств, таких как ферментация чая, виноделие, изготовление какао. Кроме того, катехины чая обладают антимикробными свойствами и применяются при лечении дизентерии. Считается также, что катехины полезны для укрепления иммунной системы и для лечения опухолей.

Катехины относят к веществам, обладающим Р-витаминной активностью. Лекарственные препараты и БАД, содержащие катехины и другие биофлавоноиды, широко используют при лечении заболеваний, связанных с нарушениями функций капилляров, отёках сосудистого происхождения и т.п.

Эпикатехин Эпигаллокатехин

4. Тритерпены.

Тритерпены – это класс углеводородов - продуктов биосинтеза общей формулы (C5H8)n, с углеродным скелетом, формально являющихся производным изопрена СН₂=С(СН₃)-СН=СН_2.

В больших количествах терпены содержатся в хвойных растениях, во многих эфирных маслах. Терпены — основной компонент смол и бальзамов, так, скипидар получают из живицы. Название «Терпены» происходит от лат. Oleum Terebinthinae — скипидар. Тритерпены, C₃₀H_48, (C₁₀H₁₆₎₃

Лупеол

II. Практическая часть

2.1. Змееголовник дланевидный – лат.Dracocephalumpalmatum

Площадь Оймяконского района – 92,2 тыс. км². Это 14-й среди наибольших по размеру улусов республики Саха. Граничит на юго-западе с Усть-Майским улусом, на западе – с Томпонским улусом, на севере – с Момским улусом, на востоке – с Магаданской областью и на юге – с Хабаровским краем. Весь район расположен южнее Северного полярного круга, следовательно, полярного дня и полярной ночи в улусе не наблюдается, притом, что летом день очень продолжительный, а зимой очень короткий. В нашем улусе по данным краеведа Е.П.Новгородова произрастает 24 вида лекарственных растений.

Мы изучали растения хребта Сарычева – это горный хребет Якутии, расположенный в междуречье верхней Индигирки и её правого притока – реки Неры. Длина хребта составляет около 200 км, высота достигает 2341 м. Хребет сложен алевролитами (твердая осадочная горная порода) и аргиллитами (твёрдая, камнеподобная глинистая горная порода), гранитов (горная порода состоит из кварца, плагиоклаза, калиевого полевого шпата и слюд). В нижней части склонов растут редкостойные лиственничные леса.

Исследования проводили на территории Оймяконского района в 25 км к северо-востоку от п. Усть-Нера в составе экологической научно-исследовательского лагеря «Эндемик» (научно-образовательный высокогорный стационар). На его базе мы занимаемся изучением высокогорных сообществ и растений хребта Сарычева, проводим исследовательские, учебные и мониторинговые исследования по экологии растений совместно с учеными МГУ, СВФУ, ИБПК СО РАН. К первым работам по данному проекту мы приступили летом 2013 года.

В 2013 году было собрано 15 видов растений, в 2014 было собрано 43 вида растений, в 2015 году было собрано 37 вида. Среди растений, собранных в 2015 г., был змееголовник дланевидный.

Это растение нам интересно тем, что оно еще никем не изучено, но широко используется коренным население Оймяконья. В быту местные жители (в основном оленеводы, ведущие кочевой образ жизни) змееголовник применяют по-разному, в основном как лекарственное растение. Из него делают различные настои, отвары, мази, заваривают чай и применяют как противовоспалительное, желчегонное и мочегонное средство, а также сырье используют при заболеваниях ЖКТ и для улучшения аппетита. Листья змееголовника добавляют как в свежем, так и в сушеном виде в чай.

Поэтому мы решили провести количественный и качественный анализ растения на содержание БАВ.

Сбор растения был произведен в фазе цветения в окрестностях р. Агаякан и хребта Сарычева (Тас-Кыстабыт). После была произведена сушка растения с целью его дальнейшего исследования. Сбор и сушка растительного сырья были проведены по правилам Государственной Фармакопеи.

Змееголовник дланевидный – лат.Dracocephalumpalmatum – сильно пахучий невысокий многолетник с продолговатыми соцветиями из ярко-синих/сиреневых цветков на коротких цветоножках. Форма цветков напоминает голову дракона, из-за чего растение и получило свое название. Длина цветков 1-3 см, и они часто кажутся неестественно крупными на приземистом растении. Листья в общем очертании яйцевидно-округлые или почти округлые, 0.5-1 см длины и ширины, не менее чем до половины надрезаны на узкие дольки, зубчатые по краю. Высота стебля около 23-25 см, он густо покрыт волосиками. Стебель и листья густо опушенные. Растение источает своеобразный аромат, особенно в жаркий день.

Распространение. Встречается этот змееголовник в Чукотской, Магаданской области и многих районах Восточной Сибири. Обычно он растет на сухих каменистых, остепененных склонах.

2.2.Определение химического состава змееголовника дланевидного, произрастающего на территории Оймяконского района РС (Я)

Для изучения химического состава растений используются методы количественного и качественного анализа на содержание групп соединений.

Для проведения качественного анализа сначала из растения получают водное и спиртовое извлечения. Далее к этим извлечениям добавляют различные реактивы, в зависимости от природы определяемой группы веществ (Таблица 4). По полученному результату делают вывод. В нашем случае извлечения должны были изменить оттенок. И в зависимости от того, изменилось ли окрашивание извлечений на необходимый оттенок и изменилось ли оно вообще, мы определяли, входят ли определенные вещества в состав исследуемого объекта или нет.

Для изучения химического состава исследуемого объекта (змееголовника дланевидного) нами были получены его водное и спиртовое (70% этиловый спирт) извлечения.

1. Качественная реакция на иридоиды.

Для обнаружения иридоидов мы провели качественную реакцию с применением реактива Трим-Хилла:

К 1 мл спиртового или водного извлечения приливали 1 мл реактива, который состоял из 0.5 мл НСl_конц, 1 мл 0.2 % водного раствора CuSO₄, 10 мл ледяной уксусной кислоты. Смесь нагревали до кипения и наблюдали за изменением цвета, чтобы определить качественную реакцию. Как мы знаем, раствор должен приобрести голубое окрашивание.

Результат. В спиртовом извлечении змееголовника дланевидного наблюдалось голубое окрашивание, значит, это растение содержит иридоиды, поэтому оно может обладать желчегонными, болеутоляющими, противовоспалительными свойствами.

2. Качественная реакция на фенольные соединения.

Щелочная проба: к 1 мл водной вытяжки, приливаем 1 мл 5% раствора NaOH в 95% этаноле. Затем проявляется ярко-желтое окрашивание.

Результат. Извлечение змееголовника дланевидного приобрело ярко-желтое окрашивание. Значит, он может обладать капиллярно-укрепляющими, противовоспалительными, желчегонными свойствами.

3. Качественная реакция на катехины.

Обнаружение катехинов мы проводили с применением реактива Бэкон-Эдельмана:

К 1 мл спиртового извлечения приливали 1 мл реактива: 0.05 г бензидина в 1 мл ледяной уксусной кислоты, довести до 10 мл этанолом, нагреть до кипения. Смесь должна была приобрести лимонно-желтое окрашивание.

Результат. Извлечение исследуемого растения приобрело лимонно-желтое окрашивание. Это значит, что змееголовник дланевидный содержит катехины, и его использование возможно при заболеваниях, связанных с нарушением функций капилляров, отеках сосудистого происхождения.

Также катехины в составе змееголовника дланевидного можно обнаружить через ванилиновую реакцию.

К 1 мл водного извлечения приливали 5 мл 1%-го раствора ванилина в НСl_конц. В результате реакции раствор должен приобрести малиновый оттенок.

Результат. Раствор змееголовника дланевидного приобрел темно-малиновый цвет, из чего можно сделать вывод, что в его состав входят катехины.

4. Качественная реакция на тритерпеновые соединения.

Для обнаружения тритерпенов мы провели качественную реакцию с применением реактива Лафона:

К 2 мл водного извлечения змееголовника дланевидного приливали 1 мл H₂SO_4конц., 1 мл 95% спирта этилового и 1 каплю 10% FeSO₄. Полученный раствор нагревали до кипения. В результате раствор должен был приобрести сине-зеленый цвет.

Результат. Раствор змееголовника приобрел сине-зеленый оттенок, из чего мы смогли сделать вывод, что тритерпеновые соединения входят в состав растения.

Анализ количественного содержания фенольных соединений и иридоидов в составе змееголовника дланевидного был проведен в лаборатории СВФУ им.М.К.Аммосова с помощью спектрофотометра, под руководством к.фарм.н., в.н.с. кафедры биохимии и биотехнологии Чириковой Н. К. (таб 1). При анализе использовались уже отработанные методики определения.

Для определения количества дубильных веществ в составе змееголовника дланевидного использовался перманганатометрический метод Левенталя, Количественное содержание дубильных веществ в змееголовнике дланевидном – 67.551 ± 1.443 соответственно. Количественное содержание вычисляли по формуле 1:

X = ,

где, V – объем раствора калия перманганата (0,02 моль/л), израсходованное на титрование извлечения, в мл; V1 – объем раствора калия перманганата (0.02 моль/л), израсходованное на титрование в контрольном опыте, в мл; m – навеска сырья, г; 0.004157 – количество дубильных веществ, соответствующих 1 мл раствора калия перманганата (0.02 моль/л) (в пересчете на танин), в г; W – потеря в массе при высушивании сырья, в %. [2]

Для определения суммы фенолокислот в составе змееголовника был использован метод прямой спектрофотометрии при 327 нм ± 3 нм (разведение 1:500) в пересчете на кофейную кислоту (удельный показатель = 700) и хлорогеновую кислоту (удельный показатель = 505)⁴. Количественное содержание фенолокислот в пересчете на кофейную кислоту – 2.452 ± 0.067, хлорогеновую кислоту – 5.114 ± 0.642. Расчетная формула имеет следующий вид:

,

где D – оптическая плотность испытуемого раствора (около 7.1596 для кофейной кислоты, 5.1651 для хлорогеновой); Vк – объем колбы; Vп – объем извлечения растения; – удельный показатель светопоглощения кофейной кислоты при λ=327 нм (700), хлорогеновой кислоты (505).

Для определения суммы флавоноидов в составе змееголовника дланевидного использовался метод прямой спектрофотометрии при 400 нм в пересчете на лютеолин-7-гликозид. Количественное содержание флавоноидов – 1.957 ± 0.155 соответственно. Содержание суммы флавоноидов в пересчете на цинарозид и абсолютно сухое сырье в процентах (Х) вычисляют по формуле:

где Dх – оптическая плотность испытуемого раствора; V1 – объем раствора А (мл); V2 – объем аликвоты взятой из раствора А (мл); V3 – объем раствора В (мл); m – масса сырья (г); W – потеря в массе при высушивании сырья(%); 145 – удельный показатель поглощения комплекса лютеолин-7-гликозида с алюминия хлоридом при длине волны 400 нм.

Для определения количественного содержания иридоидов в змееголовнике дланевидном использовался метод прямой спектрофотометрии⁵. Количественное содержание иридоидов в пересчете на гарпагида ацетат – 0.925 ± 0.210% соответственно. Содержание суммы ИР в пересчете на гарпагид и абсолютно сухое сырье (в%) вычисляли по формуле:

где А– оптическая плотность испытуемого раствора, m – навеска сырья, г, W – влажность сырья, %, 56 – удельный показатель поглощения продуктов реакции гарпагида с гидроксиламином и хлоридом железа(III).

Таблица 1

Количественное содержание БАВ в змееголовнике дланевидном

2.3 Сравнение двух видов Dracocephalumпо количеству входящих в их состав фенольных соединений и иридоидов

В результате изучения специальной литературы по змееголовнику, мы узнали, что в фармации применяется другой вид змееголовника - змееголовник молдавский (лат.Dracocephalum moldavica). Нам стало интересно, можно ли фармакопейное растение заменить нашим (змееголовник дланевидный). Поэтому мы сравнили количественное содержание действующих веществ обоих змееголовников. В результате сравнения было выявлено, что дубильных веществ и иридоидов в нашем змееголовнике больше, чем в молдавском. Суммарный количественный состав фенолокислот змееголовников особо не отличается. При влиянии природно-климатических условий отдельные вещества накапливаются по-разному: в змееголовнике молдавском (умеренный климат) преобладает кофейная кислота, а в змееголовнике дланевидном (резко-континентальный климат) – хлорогеновая (Таблица 2).

Таблица 2

Сравнительная таблица на содержание фенольных соединений и иридоидов в составе двух видов Dracocephalum

Заключение

После проделанной исследовательской работы, мы можем утверждать, что поставленные перед нами задачи были выполнены.

1. Изучены методическая, научно-популярная литература, интернет-ресурсы о БАВ, содержащихся в растениях и методах сбора растений и определения БАВ в растениях, также собран материал у жителей района об использовании растений Оймяконья в медицинских целях.

2. Организована экспедиция на места произрастания растений с целью изучения видоразнообразия флоры Оймяконья и сбора исследуемого материала.

3. Проведен качественный и количественный анализ биологически активных веществ в змееголовнике дланевидном, произрастающем в Оймяконье.

В результате проведения качественного и количественного анализа доказано, что в состав змееголовника дланевидного, произрастающего в Оймяконском районе, входят иридоиды, катехины, фенольные соединения (фенолокислоты, флавоноиды, дубильные вещества). То есть, лекарственные свойства растения были доказаны. По содержанию БАВ змееголовник дланевидный может обладать желчегонными, болеутоляющими, противовоспалительными, капиллярно-укрепляющими, противовоспалительными свойствами.

4. Проведен сравнительный анализ количественного содержания фенольных соединений и иридоидов в двух видах Dracocephalum.

Сравнительный анализ количественного содержания БАВ в змееголовнике дланевидном и змееголовнике молдавском показал, что змееголовник дланевидный ни в чем не уступает змееголовнику молдавскому, по содержанию дубильных веществ и иридоидов даже превосходит.

Мы предполагаем, что условия произрастания, а в первую очередь температурные условия, влияют не только на накопление групп соединений, но и на количественное содержание отдельных веществ.

Змееголовник дланевидный не уступает по количественным и качественным показателям БАВ фармакопейному виду змееголовнику молдавскому и является перспективным лекарственным растением.

Литература.

1. Государственная фармакопея СССР. – М.: Медицина, 1987. – Вып. 1. – c. 333.

2. О.И. Попова, А.С. Никитина, О.М. Макарова. Изучение иридоидов змееголовника молдавского, культивируемого в условиях ставропольского края. // Химико-Фармацевтический журнал. Том 42, № 6, 2008.

3. Никитина А.С. Фармакогностическое изучение змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.) и иссопа лекарственного (Hyssopus officinalis L.) с целью обоснования применения в фармации и медицине: автореф. дис. к-та фармац. наук: 15.00.02 / Никитина А. С. Пятигорск, 2008. - 20 с.

4. A.A. Andreeva, P.A. Nogovicin, E.V. Kucharova, Zh.M. Okhlopkova, N.K. Chirikova, D.N. Olennikov, I.S. Zulfugarov. Dracocephalum palmatum steph. As a model plant for biotechnology of biologically active compounds. // The 2^nd International Conference with the Elements of Scientific School for Youth «Phytobiotechnology Prospects for Improving the Quality of Life in the North». Material. October 6-10, 2014. City of Yakutsk, Sakha Republic (Yakutia), Russia.

5. Методика количественного определения суммарного содержания органических кислот в растительном сырье /Д.Н. Оленников, Л.М. Танхаева, Г.Г. Николаева, А.А. Маркарян // Растительные ресурсы. – 2004. – Вып. 3. – С. 112–116.

6. Оленников Д.Н., Танхаева Л.М. Методика количественного определения группового состава углеводного комплекса растительных объектов // Химия растительного происхождения. – 2006. – № 4. – С. 29–33.

7. Рогожин В.В. Методы биохимических исследований: учеб. пособие. – Якутск, 1999. – 116 с.

8. Биологически активные вещества (БАВ) растений // Интернет. Журнал о фитотерапии «5 лепестков». www.5lepestkov.com/?p=1573

9. Биологически активные вещества // Интернет. Википедия – свободная энциклопедия. https://ru.wikipedia.org/wiki/Биологически_активные_вещества

10. Спектрофотометр // Интернет. Википедия – свободная энциклопедия. https://ru.wikipedia.org/wiki/Спектрофотометр

11. Спектральный анализ // Интернет. Википедия – свободная энциклопедия. https://ru.wikipedia.org/wiki/Спектральный_анализ

12. Л. Р. Иванова, Л. И. Бутенко, Л. В. Лигай, В. Г. Сбежнева. Определение иридоидов в траве татарника колючего (OnopordumacanthiumL., род Onopordum)// Химия растительного сырья. – 2010. - №4. – С. 131-133.

13. В. Ю. Андреева, Г. И. Калинкина. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной AlchemillavulgarisL.S.L. // Химия растительного сырья. – 2000. - №1. - С. 85-88.

14. В. В. Иванов, О. Н. Денисенко. Количественное определение дубильных веществ в траве горца сахалинского, интродуцированного в условиях кавказских минеральных вод, различными аналитическими методами // Современные проблемы науки и образования. – 2014. - №6.

15. Н. Р. Шагалиева, А. Е. Щербовских, Е. В. Авдеева, В. А. Куркин,

И. М. Байриков, А. С. Лапина, Е. А. Филиппова. Экспериментальная оценка высвобождения фенилпропаноидов из стоматологической повязки на основе фитопрепарата «Дентос» // Фундаментальные исследования. – 2014. - №9 (часть 2). – С. 370-373.

Приложение 1.

Таблица 3. Некоторые группы соединений биологически активных веществ, их состав и свойства

Таблица 4. Качественные реакции на содержание групп соединений

1^ Биологически активные вещества // Интернет. Википедия – свободная энциклопедия. https://ru.wikipedia.org/wiki/Биологически_активные_вещества

2^Биологически активные вещества (БАВ) растений // Интернет. Журнал о фитотерапии «5 лепестков». www.5lepestkov.com/?p=1573

3^ Государственная фармакопея СССР. – М.: Медицина, 1987. – Вып. 1. – c. 333.

4^ Н. Р. Шагалиева, А. Е. Щербовских, Е. В. Авдеева, В. А. Куркин, И. М. Байриков, А. С. Лапина, Е. А. Филиппова. Экспериментальная оценка высвобождения фенилпропаноидов из стоматологической повязки на основе фитопрепарата «Дентос» // Фундаментальные исследования. – 2014. - №9 (часть 2). – С. 370-373.

5^ Л. Р. Иванова, Л. И. Бутенко, Л. В. Лигай, В. Г. Сбежнева. Определение иридоидов в траве татарника колючего (Onopordum acanthium L., род Onopordum) // Химия растительного сырья. – 2010. - №4. – С. 131-133.

6^О.И. Попова, А.С. Никитина, О.М. Макарова. Изучение иридоидов змееголовника молдавского, культивируемого в условиях ставропольского края. // Химико-Фармацевтический журнал. Том 42, № 6, 2008.

24