Исследование влияния психоактивного вещества («Снюс») на физиологическое состояние организма лабораторных животных крыс линии Wistаr в экспериментальных условия

XIV Международный конкурс научно-исследовательских и творческих работ учащихся
Старт в науке

Исследование влияния психоактивного вещества («Снюс») на физиологическое состояние организма лабораторных животных крыс линии Wistаr в экспериментальных условия

Пушков И.С. 1
1ФГКОУ "Оренбургское ПКУ"
Палаева И.Г. 1Лебедев С.В. 2
1ФГКОУ "Оренбургское ПКУ"
2ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный университет»
Автор работы награжден дипломом победителя III степени
Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке "Файлы работы" в формате PDF

Введение

Употребление психоактивных веществ является одной из основных социальных опасностей нашего времени. В России угроза новой эпидемии. И она уже в разгаре, у нее выборочная зона поражения. В первую очередь она поражает детей.  Почему? Взрослые сами решают, от чего им умирать. А от чего умирать нашим детям, решает сегодня организованная группа преступников.

Слышали такое слово «Снюс»? Если нет, то посмотрите сюжет Ивана Прозорова. «Сын шел с братишкой с тренировки. Их угостил семиклассник пакетиком с неизвестным содержимым. Племянник мой взял первый и отключился просто. Увезли на скорой помощи. Сильнейшее отравление, мальчика спасли. В пакетике никотин, ароматизаторы, химикаты — аналог шведского жевательного табака «Снюса». Правда, там его продают только взрослым. Русскоязычный же интернет завален роликами, записанными в соседней от родителей комнате. «Учителя не замечают! Такое состояние ватное», — признается подросток. И родители не в курсе — запаха нет. Поэтому от обычных сигарет уходят к таким баночкам по 200-300 рублей. В этой упаковке даже не лошадиная доза никотина. Медики выяснили, что в одной такой подушечке никотина столько же, как в трех пачках сигарет. Вряд ли нужно быть профессиональным наркологом, чтобы понять эффект от употребления. Всего через две-три недели молодой неокрепший организм снова просит «шайбу». Так между собой называют упаковку со «Снюс».

В социальных сетях его продвигают как легкую альтернативу сигаретам, утверждая о его безопасности. В безвредность, правда, сложно поверить, глядя на прожженные десны. «Снюс» продают в соседних домах, рекламируют в мессенджерах, доставляют через интернет, а дети поголовно рассказывают, как их в первый раз угостили — бесплатно [1]. Мы решили провести собственное исследование, целью которого является изучение влияния психоактивного вещества («Снюс») на физиологическое состояние организма лабораторных животных крыс линии Wistаr в экспериментальных условиях. Объектисследования – психоактивное вещество «Снюс». Предметисследования – влияние психоактивного вещества «Снюс» на физиологическое состояние живого организма.

Задачи:

рассмотреть историю создания и распространения психоактивного вещества «Снюс»;

на основе анализа литературных источников изучить состав психоактивных веществ;

провести анкетирование среди обучающихся общеобразовательных учреждений Российской Федерации на предмет осведомленности и употребления психоактивного вещества «Снюс».

экспериментальным способом проверить влияние психоактивного вещества «Снюс» на физиологическое состояние организма животных в лабораторных условиях.

Гипотеза: психоактивное вещество «Снюс» негативно влияет на физиологическое состояние организма лабораторных животных крыс линии Wistаr. Для решения поставленных задач и проверки гипотезы были использованы следующие методы исследования: анализ литературных источников, моделирование, эксперимент, наблюдение, сравнение, обобщение, анкетирование. База проведения практической части исследования: операционная вивария Оренбургского государственного университета и лаборатория ФНЦ биологических систем и агротехнологий РАН под руководством д.б.н. Лебедева С.В., научная лаборатория кафедры патологической анатомии ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава РФ под руководством д.м.н., профессора Поляковой В.С.

1. Теоретическое обоснование влияния психоактивного вещества («Снюс») на физиологическое состояние организма лабораторных животных крыс линии Wistаr в экспериментальных условиях

1.1. История создания и распространения психоактивного вещества «Снюс»

«Снюс» (по-шведски "snusa" значит "нюхать") впервые появился в Швеции в 1637 году и до сегодняшнего времени он в большей мере производился и употреблялся именно в этой стране. Распространилось употребление «Снюс» и в другие страны. Он стал чрезвычайно популярным в Норвегии и завоевал определенную популярность и в странах Европейского Союза, США и России. Во всех странах, кроме США, Швеции и Норвегии, его продажа была запрещена из-за его вредного влияния на организм. Вред «Снюс» оценивается как более сильный, чем от курения табака.

В странах Европы, кроме Швеции, благодаря стараниям Всемирной организации здравоохранения «Снюс» попал под запрет законодательства с 1993 году. В Российской Федерации запрет на эту форму сосательного табака был введен в 2013 году [2], а с изменениями и дополнениями вступил в полную силу только с 01.04.2021 года, согласно которому запрещается оптовая и розничная торговля насваем, табаком сосательным («Снюс»), пищевой никотинсодержащей продукцией, а также никотинсодержащей продукцией, предназначенной для жевания. Однако данную продукцию до сих пор продолжают ввозить в страну и свободно продают в интернете [3].

1.2. Виды, состав и действие психоактивного вещества «Снюс»

Существуют два вида упаковки «Снюс»: порционный – упаковывается в небольшие похожие на чайные пакетики по 0, 3 – 2 г, рассыпной – он продается на вес в картонных упаковках с пластиковой крышкой [4]. Основными составляющими  являются:  никотин (99,95%)водаповаренная сольсода (Е500), целлюлоза (Е460), пропилен гликоль (Е1520), карбонат калия (Е501), гидроксид натрия (Е524), ароматизаторыКислотность  составляет pH 7,8-8,5. Щелочная реакция облегчает проникновение никотина в ткани. Содержание никотина в «Снюс» в 5 раз выше, чем в обычной сигарете [5] «Снюс» содержит более 30 химических веществ, с потенциальным канцерогенным эффектом. Самые опасные из них - нитрозамины, которые образуются ещё при производстве, в процессе ферментации табака. Содержание N-нитрозаминов по специфическим соединениям (на 1 г): N'-нитрозонорникотин (NNN) — 5-9 мкг; 4-(метилнитрозамино)-1-(3-пиридил)-1-бутанон (NNK) — 1-2 мкг; N'-нитрозоанатабин (NAT) — 2-5 мкг. Никотин и другие вещества высвобождаются из «Снюса» в слюну, затем, всасываясь через слизистую полости рта, они сразу попадают в кровоток, а далее последовательно поступают в верхнюю полую вену, правые отделы сердца и малый круг кровообращения [6].

2. Исследование воздействия психоактивного вещества («Снюс») на организм лабораторных животных крыс линии Wistаr в экспериментальных условиях

2.1 Анкетирование «Ваше отношению к «Снюс»

Анкетирование «Ваше отношению к Снюс» среди обучающихся общеобразовательных учреждений Российской Федерации на предмет осведомленности и употребления никотин содержащего вещества «Снюс» проводилось в период с 22.12.2019 г. по 10.01.2020г. Опрос проводился кадетами «Оренбургского президентского кадетского училища» в их регионах проживания. Всего в анкетировании приняло 2568 ребят из разных уголков России (приложение 1).

Анализируя полученные результаты в таблице №1 (приложение 2) следует отметить, что основная часть респондентов – 80% знакомы, с таким психоактивным веществом, как «Снюс»; 18% не знакомы; 2 % затруднялись ответить.

На вопрос «Предлагали ли тебе «Снюс»?» 66% респондентов ответили, что не предлагали. Однако 34% отметили, что все же окружающие предлагали им попробовать. Настораживает в данной ситуации то, что 26% отметили, что им предлагали друзья; 25% -знакомый, сам употребляющий «Снюс»; 24% - одноклассник; 17% - незнакомый человек; 8% - родственники. 23% респондентов-подростков не пробовали «Снюс», но к сожалению 77% отметили, что употребляли данное вещество. Распределение участников анкетирования, ответивших на вопрос «Знаешь ли ты о вредном действии «Снюс» на здоровье человека?» составило: 57% респондентов, что да, действительно знакомы; 21% - не знают; 16% - знают, но с ними этого никогда не случится; 6% - знают, но думаю о том, что смогут в любой момент остановиться. Результаты анкетирования подростков свидетельствую о том, что если бы обучающиеся узнали о том, что их друзья употребляют «Снюс», то: сообщили родителям - 27%; поговорили с другом и предложили свою помощь – 27%; посоветовали обратиться к врачу-наркологу – 18%; сообщили классному руководителю – 18%; ничего бы не делали, посчитали, что это их личное дело – 10%. Чтобы предотвратить употребление «Снюс» среди детей были предложены следующие варианты: запретить производить, продавать – 41%; пропагандировать ЗОЖ –12%; больше контроля за детьми – 8%; ужесточить (ввести) наказания – 7%; никак – 12%; не знаю – 9%; разрешить продажу – 5,5%; повысить цену – 5,5%.

Таким образом, можно сделать вывод о том, что проблема употребления психоактивного вещества «Снюс» имеет достаточное распространение среди подростков и несет в себе разрушающий вред для личности ребенка.

2.2 Методика исследования

Цель: изучить воздействия ПАВ«Снюс» на организм лабораторных крыс линии Wistаr. Исследования были проведены в условиях экспериментально-биологической лаборатории Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий российской академии наук»; под руководством доктора биологических наук С.В. Лебедева и научного сотрудника Института биоэлементологии ФГБОУ ВПО «Оренбургский государственный университет» Е.В. Шейда (приложение 3) на модели крыс линии Wistar, которые содержались на стандартной диете для лабораторных животных (ГОСТ Р 50258-92) согласно правилам лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ (ГОСТ 3 51000.3-96 и 51000.4-96) [7]. Методика проведения эксперимента была одобрена этическим комитетом, составлен акт от «4» декабря 2019 года на выполнение работы и акт от «14» января 2020 года о выведение группы животных из эксперимента (приложение 4).

Для проведения эксперимента были отобраны 6-месячные крысы-самцы массой 140 - 160 г, из числа которых методом пар-аналогов были сформированы две группы: контрольная и опытная, по 10 особей в каждой. Режим содержания и рацион питания был одинаков во всех экспериментальных группах (комбикорм на основе пшенично-ячменной корм-смеси 70%, с содержанием 172,3 г/кг сырого протеина). Исследования проводились в течение 14 суток. Результаты фиксировали на 1-е, 7-е и 14-е сутки.

В таблице №2 (приложение 5) представлены данные о режиме содержания опытных групп крыс линии Wistar: опытной группе на протяжении всего эксперимента ректально вводили препарат «Снюс» по 2 мг 5 раз в день (из расчета 150 мг в 1 пакетике и употребление примерно 5 раз в сутки, то: 150*5=750 мг- это на 70 кг (средний вес человека), а на 160 г (крыса) соответственно 2 мг на голову в сутки), а контрольной группе – изотонический раствор хлорида натрия (0,9%) в эквивалентном объёме.

2.3 Исследование химического состава ПАВ «Снюс» на тяжелые металлы

Химический анализ психоактивного вещества «Снюс» проводился с помощью оборудования: весы лабораторные CE-224-C и спектрофотометр атомно-адсорбционный «Квант 2». Результаты анализа свидетельствуют о содержании тяжелых металлов: железа, свинца, меди, цинка, кадмия в образце «Снюс» и представлены в протоколе испытаний экспертиза №2 (ГОСТ 30178-96) от «29» января 2020 года в таблице №3 (приложение 6).

2.4 Определение общего состояния животных

Для определения воздействия ПАВ «Снюс» на физиологическое состояние организма проводили клинический осмотр, при этом регистрировали общее состояние животных, температуру тела, состояние шерстного покрова, видимых слизистых оболочек и оказываемый эффект ПАВ «Снюс».

Таким образом, на основании проведенного наблюдения, результаты которого представлены в таблице №4 и в таблице №5 (приложение 7), на 1, 7 и 14 сутки наблюдаются значительные изменения в общем состоянии животных опытной группы, снижены показатели поедаемости корма (определяли путем взвешивания остатков корма), состояния шерстного покрова и слизистых оболочек у крыс на фоне применения ПАВ «Снюс».

2.5 Определение эмоциональной, двигательной активности и ориентировочно-исследовательское поведения животных

Спонтанную двигательную активность исследовали в системе «Инфракрасный актиметр в комплекте с системой Панель с отверстиями». Использовали систему инфракрасных лучей для детектирования движений животных, измеряющую количество лучей, разбивающихся на оси Х и Y и число погружений животных в отверстия для оценки двигательной активности и стереотипных движений, а также исследования/любопытства при (помощи панели с отверстиями).

Программное обеспечение системы позволяет сделать анализ траектории движения животного (расстояния, скорости, времени, проведенного в определенных зонах). В приложении 8 представлена таблица №6 со средними значениями двигательной активности и диаграмма уровня двигательной активности животных.

При проведении теста «ИК актиметр» у животных опытной группы на 14-е сутки исследования, относительно контрольной группы, двигательная активность снизилась, что является доказательством действия ПАВ «Снюс» на физиологическое состояние живого организма.

"Открытое поле" - классическая модель исследования поведения, основанная на конфликте двух мотиваций - инстинктивной тенденции к исследованию нового окружения и тенденции минимизировать возможную опасность со стороны такового. Тест "открытое поле" является информативной методикой, позволяющей адекватно оценивать нейротропные эффекты повреждающих факторов окружающей среды. В тесте оцениваются двигательная и ориентировочно-исследовательская активность.

Из результатов, полученных в ходе эксперимента и табличных данных (таблица №7), следует, что в контрольной группе животных, спустя 10 минут наблюдения после введения ПАВ «Снюс», оказывает резко угнетающее действие на общую двигательную активность животных (ОДА снижалась на 100%), причем у всех животных опытной группы никакой двигательной активности не отмечалось. Следует также отметить отсутствие любопытства у животных под влиянием ПАВ «Снюс», у крыс отсутствовала ориентировочно-исследовательская деятельность (обследование отверстий, стенок прибора), тогда как животные контрольной группы вели себя достаточно активно, пересекая арену «Открытого поля» по центру они также очень активно передвигались по периферии и 2/3 площади прибора, активно обследовали отверстия и стенки прибора. Акты дефекации и мочеиспускания в опытной группе также отсутствовали, что возможно связано со спазмом мускулатуры выводящих путей.

При повторном предъявлении теста «Открытое поле» через 30 минут после введения ПАВ «Снюс», двигательная активность животных контрольной группы, относительно экспозиции времени 10 минут, становилась спокойнее на 36 %, что является нормальным при повторном предъявлении теста – эффект привыкания, при этом уровень ГДА (горизонтальная двигательная активность) снизился на 25,9 %, уровень ВДА (вертикальная двигательная активность) на 50,8 %, а показатель любопытства на 43,6 %. При этом также снизились эмоциональность и уровень нервного напряжения (количество актов дефекации в 4 раза ниже относительно экспозиции времени 10 минут), что свидетельствует об адаптации животных и стабилизации обменных процессов в нервной системе. В опытных группах спустя 30 минут поведение животных немного активизировалось, относительно экспозиции времени 10 минут у животных отмечалась горизонтальная двигательная активность, однако по прежнему у крыс под влиянием ПАВ «Снюс» отмечалась только периферическая ГДА и уровень ее был ниже, чем в контроле на 95,2 %, уровень тревожности при этом нарастал, количество актов дефекации были выше относительно контроля в 4 раза.

Следует также отметить, что в опытной группе к 30 минутам исследования, как и при исследовании спустя 10 минут после введения жевательной смеси «Снюс», уровень ВДА, уровень ориентировочно-поведенческой активности и любопытства полностью отсутствовали.

Спустя 60 минут исследования поведение животных контрольной группы значительно не изменилось (сохранялась тенденция к снижению ДА), у животных данной группы уровень общей ДА снизился на 11,9 %, уровень любопытства при этом также снизился на 4,5 %, наряду с этим была выявлена тенденция к ослаблению уровня эмоционального напряжения и страха относительно экспозиции времени 30 минут в 2 раза.

В опытных группах ОДА (ориентировочно- исследовательская активность) относительно экспозиции времени 30 минут стала выше на 55,7 %, при этом также отмечалась только ГДА. У крыс под влиянием ПАВ «Снюс» спустя 60 минут также не отмечалась ВДА. Показатели груминга у животных под влиянием ПАВ «Снюс» спустя 60 минут исследования становились выше чем у контрольных животных более чем в 5 раз, что свидетельствует о усилении эмоционального напряжения. Данные представлены в таблице №7 (приложение 9).

Таким образом, на основании вышеизложенного, следует отметить, что «Снюс» оказывает разрушающие действие на состояние центральной нервной системы, способствует нарушению обменных процессов и тем самым понижает устойчивость организма к стресс-факторам различной этиологии.

2.6 Гистологического исследования головного мозга

Методика: для гистологического исследования взяты сенсомоторная зона и кора мозжечка опытных и контрольных животных. После промывки в водопроводной воде материал обезвоживали в спиртах возрастающей концентрации и залили парафин-целлоидин. Приготовление серийных срезов толщиной 5-6 мкм осуществляли на ротационном микротоме МПС-2. Парафиновые срезы окрашивали гематоксилином Майера и эозином. Срезы изучали на микроскопе Микмед-6, фотографировали с помощью цифровой камеры DCM-510.

На 14 сутки после введения «Снюс» в сенсомоторной зоне коры головного мозга наблюдаются проявления периваскулярного отека, в отдельных сосудах – стазы, относительно контрольной группы. Исследование показало, что в зоне отдельных пирамидных нейронов опытной группы – перицеллюлярный отек. Окраска нейронов базофильная, а так же в коре мозжечка в опыте наряду с неизмененными зонами имеются очаги уменьшения числа клеток Пуркинье, появление клеток с кариопикнозом и плазмолизисом (приложение 10).

Полученные данные свидетельствуют о том, что наибольшие изменения в коре головного мозга крыс связаны с нарушениями кровообращения, поэтому целесообразным было исследование токсического влияния психоактивного вещества «Снюс» на морфологические и биохимические показатели крови.

2.7 Анализ морфологических и биохимических показателей крови

Методика: из хвостовой вены лабораторных животных (крыс линии Wistar) был взят забор крови на анализ. Данные обработаны с помощью автоматического гематологического анализатора URIT-2900 Vet Plus и занесены в таблицу. Результаты наших исследований показали изменение показателей системы гемостаза на фоне введения препарата «Снюс» по отношению к контрольной группе. В таблице №8 представлены результаты исследований о влиянии ПАВ «Снюс» на морфологический состав крови крыс после его применения в дозе 2 мг/гол через 14 суток эксперимента.

Результаты наших исследований показали изменение показателей системы гемостаза после введения сосательной смеси (5 мг/гол) по отношению к контрольной группе. В ходе анализа морфологических показателей крови крыс через 7 суток после введения ПАВ «Снюс», было выявлено, что у животных опытной группы содержание эритроцитов и гемоглобина в крови было выше контроля на 7% и 6 %, соответственно.

Количество лейкоцитов в крови непостоянно. При морфологическом анализе крови было установлено, что количество лейкоцитов у животных опытной группы было ниже на 10,6% по сравнению с контрольной группой.

Развернутый анализ крови определяет процентное соотношение лейкоцитов различных типов: нейтрофилов, эозинофилов, базофилов, лимфоцитов и моноцитов. Доля некоторых из них при определенных заболеваниях или состояниях организма может возрастать, а других - пропорционально снижаться. Поскольку лимфоциты измеряются и могут быть повышены как в абсолютном, так и в относительном значении, то и рассматриваются данные состояния в отдельности как абсолютный лимфоцитоз (повышение общего количества лимфоцитов в крови) и относительный лимфоцитоз (повышение доли лимфоцитов в общем количестве лейкоцитов).

Установлено, что процент лимфоцитов в опытной группе был выше контрольного уровня на 10,5%, соответственно. Процентное содержание моноцитов в опытной группе было выше также на 10,5%, относительно контроля. Процентное содержание гранулоцитов в опытной группе было ниже на 16,4% чем в контрольной группе.

Снижение тромбоцитов развивает риск повреждения сосудов, развития длительных кровотечений. И напротив, высокие тромбоциты в крови говорят о повышении вероятности тромбообразования, закупорке сосудов, и, что страшней всего, формировании тромбоэмболов (оторвавшихся от стенки сосуда тромбов, свободно перемещающихся по организму и приводящих к закупорке важнейших сосудов организма, где тромбы обычно не образовываются). Так, анализ количества тромбоцитов в крови крыс через 14 суток показал, что в опытной группе их количество было выше на 21%, относительно контроля в таблице №8 (приложение 11).

Анализ биохимических параметров сыворотки крови лабораторных животных опытной группы через 14 суток введения исследуемой смеси «Снюс» показал значительные сдвиги, в первую очередь, в активности основных энзимов: аспартатаминотрансферазы (АСТ), креатинкиназы и лактатдегидрогеназы (ЛДГ), значения которых составили разницу с контрольными показателями в 2,2 раза (Р≤0,05); на 40,2% (Р≤0,05) и в 3,2 раза, соответственно (таблица №9). Так как одной из основных причин повышения уровня активности трансаминазных ферментов (АЛТ и АСТ) является их выход из повреждённых органов и тканей в кровяное русло, можно предположить о наличии развивающихся деструктивных процессов в гепатоцитах и кардиомиоцитах, так как именно в клетках печени и сердца локализуется наибольшее количество трансаминаз.

На фоне введения ПАВ «Снюс» необходимо отметить в первую очередь снижение (на 15,7%) концентрации глюкозы. В свою очередь, наблюдаемая тенденция гипогликемии в крови опытных животных, вероятно, связана с нарушением процессов гликогенолиза и глюконеогенеза в печени на фоне введения «Снюс».

Обращает на себя внимание увеличение содержания в крови опытных крыс креатинина (на 16% ((Р≤0,05)), что является одним из критериев, наряду с уровнем мочевины, изменения деятельности почек. Концентрации мочевины при этом также несколько превышает контрольное значение в таблице №9 (приложение 11).

Таким образом, полученные данные выявили существенные сдвиги в основных биохимических показателей крови на фоне введения в организм экспериментальных животных исследуемой смеси уже после 2-х недельного введения. Значительно возросшая активность таких ключевых энзимов, как ЛДГ, АСТ и креатинкиназа, хоть и косвенно, свидетельствует, прежде всего, о деструктивных (повреждающих) изменениях в клетках организма. В свою очередь, повышение уровня креатинкиназы также может служить маркером развивающегося оксидативного стресса у животных опытной группы и нарушения со стороны центральной нервной системы. Несмотря на отсутствие выраженной органной специфичности, определение активности АСТ и АЛТ имеет большую диагностическую ценность. При этом повышение активности АСТ указывает на преимущественное поражение сердца, а АЛТ – печени. Исходя из того, что у опытных крыс наблюдалось значительное увеличение уровня АСТ в крови, во все временные отрезки наблюдения, можно предположить о токсическом воздействии «Снюса» на миокардиоциты (в большей степени) и гепатоциты.

Негативное влияние ПАВ «Снюс» на организм крыс проявился и в установленном гипогликемическом эффекте, наблюдаемом на протяжении всего эксперимента. 65 – 70% циркулирующей в крови глюкозы утилизируется центральной нервной системой. Это и предопределяет опасность гипогликемических состояний, существенно изменяющих метаболизм мозга, что, в конечном итоге, приводит к гибели нейронов и нарушению функции мозга.

При расшифровки биохимического анализа крови установлено превышение от нормы (контроля) аланинаминотрансферазы (АЛТ) на 30,4% и аспартатаминотрансфераза (АСТ) на 36,7%, свидетельствует о проблемах в функционировании определенных органов, в частности о развитии в организме таких заболеваний, как инфаркт миокарда, цирроз печени, рак печени, различные формы гепатита, поражения печеночной ткани в результате токсического отравления.

Таким образом, высокая ферментативная активность АСТ, АЛТ в крови после употребления исследуемого вещества свидетельствует о нарушении физиологического состояния организма, в частности нарушения функции печени, почек, сердечной мышцы.

Заключение

Результаты проведенного лабораторного исследования позволили нам сделать вывод, что «Снюс» отрицательно влияет на общее морфологическое и физиологическое состояние животных крыс линии Wistar, нарушая работу практически всех основных систем жизнедеятельности организма: сердечно- сосудистой, дыхательной, пищеварительной и выделительной, а также оказывает разрушающее действие на центральную нервную систему и понижает устойчивость организма к стресс-факторам различной этиологии.

Проведенное исследование показало, что употребление «Снюс» представляет серьезную угрозу для здоровья человека, а значит, является одной из основных социальных опасностей нашего времени, направленной, в первую очередь, на детей и подростков.

Борьба с данным явлением требует активного участия государства и общества в решении этой острой социальной проблемы. Чтобы достигнуть определенного успеха в преодолении распространения употребления «Снюс», необходима координация усилий всех субъектов, имеющих прямое отношение к жизни и здоровью молодого поколения, с целью выработки в подростковой среде негативного отношения к употреблению психоактивных веществ, формирование позитивных ценностей и установок на здоровый образ жизни.

Таким образом, все поставленные задачи решены; достигнута цель и доказана гипотеза исследования. Результаты исследования доведены до командования училища, кадет, воспитателей и преподавателей, а также пользователей сети Интернет. Перспективным направлением дальнейшей работы считаем проведение исследования микробиологического анализа никотин содержащей смеси «Снюс» на присутствие патогенных микроорганизмов и его действие на репродуктивную функцию лабораторных животных крыс линии Wistar.

Список используемой литературы

https://www.1tv.ru/news/2019-11-26/376411-snyusy_ubiystvennaya_moda_u_detey_i_chego_my_ne_znaem_o_konfetkah_s_nikotinom.

Федеральный закон от 21.10.2013 № 274-ФЗ «О внесении изменений в Кодекс Российской федерации об административных правонарушениях и Федеральный закон «О рекламе» в связи принятием Федерального закона «Об охране здоровья граждан от взаимодействия окружающего табачного дыма и последствий потребления табака».

Idris A. M., Ibrahim S. O., Vasstrand E. N., et al. The Swedish snus and the Sudanese toombak: are they different? (англ.) // Oral Oncol. (англ.) русск. : journal. — 1998. — November (vol. 34, no. 6). — с. 558—566.

Digard H., Errington G., Richter A., McAdam K. Patterns and behaviors of snus consumption in Sweden (англ.) // Nicotine Tob. Res. (англ.)русск. : journal. — 2009. — October (vol. 11, no. 10). — с. 1175—1181.

https://www.rospotrebnadzor.ru

Foulds J., Ramstrom L., Burke M., Fagerström K. Effect of smokeless tobacco (snus) on smoking and public health in Sweden (англ.) // Tob Control (англ.) русск. : journal. — 2003. — December (vol. 12, no. 4). — с. 349—359.

Хабриев Р.У. «Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» / под ред. Р.У. Хабриева. – 2-изд., перераб. И доп.. – М.: ОАО Изд. «Медицина». – 2005 г. – 832 с.

Приложение 1

К арта мест проведения анкетирования «Кадеты против «Снюс»

Приложение 2

Таблица №1. Результаты анкетирования

Вопрос

Количество/%

1.

Знаешь ли ты, что такое «Снюс»?

да

2054/80%

нет

462/18%

затрудняюсь ответить

52/2%

2.

Предлагали ли тебе когда-нибудь «Снюс»?

да

873/34%

нет

1695/66%

3.

Если предлагали, то кто?

друг

227/26%

из 873/34% респондентов

знакомый, сам употребляющий «Cнюc»

218/25%

одноклассник

210/24%

незнакомый человек

148/17%

родственник

70/8%

4.

Пробовал ли ты «Снюс»?

да

1977/77%

нет

591/23%

5.

Знаешь ли ты о вредном действии «Снюс» на здоровье человека?

да

1464/57%

знаю, но со мной этого не случится

411/16%

знаю, но я всегда смогу бросить принимать

154/6%

нет

539/21%

6.

Что бы ты предпринял, если бы узнал, что твой друг употребляет «Снюс»?

сообщил бы родителям

693/27%

посоветовал бы обратиться к врачу-наркологу

462/18%

сообщил бы классному руководителю

462/18%

поговорил бы с другом и предложил свою помощь

693/27%

ничего бы не сделал, это его личное дело

258/10%

7.

Как ты считаешь, как можно предотвратить употребление «Снюс» среди детей?

запретить производить, продавать

1053/41%

пропагандировать ЗОЖ

308/12%

больше контроля за детьми

205/8%

ужесточить (ввести)наказания

180/7%

разрешить продажу

141/5,5%

повысить цену

141/5,5%

никак

308/12%

не знаю

232/9%

Приложение 3

Проведение исследования операционная вивария Оренбургского государственного университета и лаборатория ФНЦ биологических систем и агротехнологий РАН под руководством д.б.н. Лебедева С.В., научная лаборатория кафедры патологической анатомии ФГБОУ ВО «Оренбургский государственный медицинский университет» Минздрава РФ под руководством д.м.н., профессора Поляковой В.С.

   
 

Подготовительный период

Приложение 4

Акт о постановки эксперимента

   

Приложение 5

Таблица №2. Схема проведения эксперимента

Лабораторные животные

Группы

Введение препаратов в течение 14 суток

Учетный период

Крысы линии Wistar

I Контрольная

(n=10)

ОР

0,9 %-ный

NaCl*

ОР

+

наблюдение на 1-е, 7-е и 14-е сутки

II

Опытная

(n=10)

ПАВ «Снюс»*

Примечание – ОР – общий рацион, * - ректальное введение

 

Крысы линии Wistar

(n=20)

 

Опытная группа

Контрольная группа

 

ПАВ «Снюс»

 

Введение препаратов на протяжении всего эксперимента*

 

0,9 %-ный

NaCl

 

Наблюдение на 1-е, 7-е и 14-е сутки

 

Температура,

состояние шерстного покрова

состояние слизистых оболочек, поедаемость корма, общее состояние

Поедаемость корма,%

Определение общего состояния

 

Этологические исследования

 

Эмоциональная, двигательная и ориентировочно-исследовательская активность

 

Морфометрическое состояние тканей головного мозга

Гистологические исследования

 

Морфологические и биохимические показатели крови

Анализ крови

П риложение 6

Таблица №3. Результаты химического анализа психоактивного вещества «Снюс»

Приложение 7

Таблица №4. Определение общего состояния животных

Показатели

Группы

Контрольная

Опытная

Общее состояние

Нормальное

Угнетенное

Температура, оС

37,9

38,6

Состояние шерстного покрова

Гладкая, умеренно увлажненная

Сухая, взъерошенная

Состояние слизистых оболочек

Умеренно увлажненные, бледно-розовые, без повреждений.

Бледность видимых слизистых оболочек

Поедаемость корма,%

100

55

Таблица №5. Динамика изменений состояния крыс после введения ПАВ "Снюс"

Время после введения вещества

Состояние животных

Описание эффекта

60 секунд

Немного возбужденное

Животные немного взволнованы и напуганы (возможно это связано со способом введения вещества)

5 минут

Угнетенное

Резкое снижение двигательной активности, судороги, парез конечностей. Бледность видимых слизистых оболочек. Снижение тактильной чувствительности.

10 минут

Угнетенное

Снижение двигательной активности, животные лежат в боковом положении, дорсально запрокинув головы, отмечаются судороги, атаксия, а некоторые животные (50%) совершают движения перекатываясь со спины на живот. Цианоз видимых слизистых оболочек, тахикардия. Дыхание поверхностное, учащенное.

20 минут

Угнетенное

Состояние крайне угнетенное, атаксия, животные лежат, отсутствует тактильная и болевая чувствительности.

30 минут

Угнетенное

Состояние угнетенное, атаксия, крысы лежат в одной позе, шерсть взъерошена. Аппетит отсутствует.

60 минут

Угнетенное

Животные угнетены, группируются, двигательная активность снижена, передвигаются исключительно по периферии клетки; учащенное поверхностное дыхание и тахикардия.

90 минут

Удовлетворительное

Не активны. Ведут себя спокойно, безучастно.

120 минут

Нормальное

Активность немного снижена, животные спокойны, аппетит отсутствует.

Приложение 8

Определение двигательной активности лабораторных животных

Таблица №6. Среднее значение двигательной активности в системе «Инфракрасный актиметр в комплекте с системой Панель с отверстиями»

Группы крыс

Среднее значение активности

1-е сутки

7-е сутки

14-е сутки

Контрольная

X=7

Y=11

W=18

X=7

Y=11

W=18

X=7

Y=11

W=18

Опытная

X=3

Y=5

W=7

X=0

Y=2

W=2

X=0

Y=2

W=2

   

Приложение 9

Таблица №7. Результаты исследования на поведенческую активность крыс в «Открытом поле» в дозе 2 мг/гол

Параметры

Экспозиция 10 минут

Экспозиция 30 минут

Экспозиция 60 минут

Контроль

Опыт

Контроль

Опыт

Контроль

Опыт

Периферическая ГДА

29,67±0,33

0,00±0,00

23,00±0,58

1,33±0,67

18,67±0,33

2,33±0,33

ГДА 2/3площадки

6,67±0,33

0,00±0,00

3,33±0,33

0,00±0,00

3,00±0,00

0,33±0,33

ГДА центр площадки

1,00±0,00

0,00±0,00

1,33±0,33

0,00±0,00

2,00±0,00

0,33±0,33

ГДА суммарная

37,33±0,33

0,00±0,00

27,67±0,33

1,33±0,67

23,67±0,33

3,00±0,58

ВДА Climbing

14,67±1,67

0,00±0,00

7,33±0,67

0,00±0,00

6,00±0,00

0,00±0,00

ВДА Rearing

5,00±0,58

0,00±0,00

2,33±0,33

0,00±0,00

2,67±0,33

0,00±0,00

ВДА суммарная

19,67±2,19

0,00±0,00

9,67±0,88

0,00±0,00

8,67±0,33

0,00±0,00

Груминг короткий

1,00±0,00

0,00±0,00

0,67±0,33

0,33±0,33

0,67±0,33

3,33±0,67

Груминг длинный

0,00±0,00

0,00±0,00

0,33±0,33

0,67±0,33

0,33±0,33

1,67±0,33

Груминг суммарный

1,00±0,00

0,00±0,00

1,00±0,58

1,00±0,00

1,00±0,58

5,00±1,00

Обследование отверстий

13,00±0,58

0,00±0,00

7,33±0,33

0,00±0,00

7,00±1,00

0,00±0,00

Дефекация

2,67±0,33

0,00±0,00

0,67±0,33

2,67±0,33

0,33±0,33

1,67±0,33

Приложение 10

Морфометрическое состояние тканей головного мозга

А

В

С

D

Кора головного мозга и мозжечок крыс

14-е сутки после ректального введения ПАВ «Снюс»

А – фрагмент сенсомоторной зоны коры контрольной группы;

В – фрагмент коры мозжечка контрольной группы;

С – фрагмент сенсомоторной зоны коры опытной группы;

D – фрагмент коры мозжечка опытной группы

1 периваскулярный отек;

2 пирамидные нейроны;

кариопикноз;

плазмолизис.

Окраска: гематоксилин Майера – эозин.

Увел. 600.

2

1

4

3

Просмотров работы: 126