Динамика изменения морфометрических показателей ядер гепатоцитов белых крыс при действии многократной умеренной воздушной гипотермии

XX Международный конкурс научно-исследовательских и творческих работ учащихся
Старт в науке

Личный портфель
  • Главная
  • Список секций
  • Биология
  • Динамика изменения морфометрических показателей ядер гепатоцитов белых крыс при действии многократной умеренной воздушной гипотермии

Динамика изменения морфометрических показателей ядер гепатоцитов белых крыс при действии многократной умеренной воздушной гипотермии

Долгатова П.А. 1
1Муниципальное бюджетное общеобразовательное учреждение «Средняя общеобразовательная школа №75»
Долгатов А.Ю. 1Бобров И.П. 1
1ФГБОУ ВО АГМУ Минздрава России
Автор работы награжден дипломом победителя III степени
Диплом школьникаСвидетельство руководителяСвидетельство руководителя
Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке "Файлы работы" в формате PDF

Введение.

В настоящее время не только проблема холодового травматизма не теряет своей актуальности среди судебно-медицинских экспертов, но и наиболее остро возникает вопрос дифференциальной диагностики между смертельным охлаждением и другими патологическими состояниями [1, 2]. Не решенным остается вопрос специфической морфологической диагностика холодовой смерти в зависимости от интенсивности и длительности действия холода, в зависимости от среды охлаждения на воздухе или в воде [3, 4]. Нельзя забывать о том, что дозированная гипотермия оказывает хороший лечебный эффект и широко используется в спортивной и восстановительной медицине, в санаторно-курортном лечении, давно известны и широко применяются различные методы закаливания, но в доступной литературе мы обнаружили морфологические работы касающиеся только острой глубокой гипотермии, хроническая же гипотермия на микроскопическом уровне изучена не достаточно и нуждается в дальнейшей разработке [5-12].

Объекты исследования: исследование проводили на 15 половозрелых самцах белых крыс линии Вистар массой 230±0,7грамм.

Методика моделирования многократной умеренной воздушной гипотермии.

После доставки животных из центрального вивария в виварий кафедры в течении пятнадцати дней был период адаптации к новому помещению. Доступ к воде и к корму был свободным. Постоянно осуществлялась приточно-вытяжная вентиляция. Смена подстилки, пополнение запасов пищи и воды в клетках проводили в одно и то же время в ровно в восемь часов утра. Многократную умеренную воздушную гипотермию проводили ежедневно с одиннадцати часов утра до тринадцати часов дня. Животных помещенных в отдельные клетки помещали в холодильную камеру при температуре +5 С° время экспозиции в среднем составляло 90±5 минут. Животных выводили из эксперимента под эфирным наркозом путем декапитации при помощи гильотины сразу после однократной умеренной воздушной гипотермии и через два дня ежедневной воздушной умеренной гипотермии. Контрольную группу составили 5 интактных животных из той же партии. Фрагменты печени фиксировали в нейтральном 10% формалине. Время фиксации составляло 12-24 часа, далее фрагменты печени заливали в парафиновые блоки с парафиновых блоков были сделаны срезы толщиной 5мкм с последующим окрашиванием гематоксилином и эозином.

Для определения количества ДНК в ядрах препараты окрашивали по методу Фельгена.

Далее проводили микроскопию в каждом препарате исследовали по пять полей зрения в каждом поле зрения оценивали не менее 30 ядер гепатоцитов. После микроскопии проводили фотографирование препаратов используя микроскоп Leica DM 750 Е200 (Германия) совместно с цифровой камерой Leica ЕС3 (Германия), использовали увеличение х1000. Для проведения морфометрии пользовались лицензированной морфометрической программой ВидеоТест-Морфология 5.2 («ВидеоТест», Санкт-Петербург).

Рассчитывали следующие параметры: площадь ядер гепатоцитов, периметр ядер гепатоцитов, диаметр и плоидность ядер гепатоцитов.

Статистический анализ полученных данных осуществляли используя специализированные программы Statistica10.0 и MS EXCEL 2010.

Результаты проведенного исследования.

Результаты проведенного исследования показали

Параметр

Контрольная группа

(1 группа)

Сразу после однократной умеренной воздушной гипотермии

(2 группа)

После 2-х дней ежедневной умеренной воздушной гипотермии

(3 группа)

ИНДНК (С)

4,2±0,4

6,23±0,2

7,3±0,3

Площадь мкм²

24,2±1,2

48,8±0,1

58,1±0,4

Периметр мкм

17,6±0,4

25,6±0,3

27,7±0,4

Диаметр мкм

5,6±0,1

8,0±0,09

8,7±0,1

Фактор круга отн.ед.

0,968±0,003

0,930±0,005

0,944±0,002

Фактор эллипса отн.ед.

0,998±0,0002

0,996±0,0002

0,997±0,0002

Удлиненность отн.ед.

1,18±0,02

1,11±0,01

1,13±0,01

Данные считали достоверными при р<0,05.

Во второй группе относительно контрольной группы показатели ИНДНК увеличились в 1,5 раза, увеличение площади 2 раза, периметра 1,5 раза, диаметра 1,4 раза, фактор формы уменьшился на 0,038 отн.ед., фактор эллипса уменьшился 0,002 отн.ед., удлиненность 0,07 отн.ед.

В третьей группе относительно второй группы показатели ИНДНК увеличились в 1,2 раза, площади 1,2 раза, периметра 1,1 раз, диаметра в 1,1 раза, увеличился фактор круга 0,014 отн.ед., фактор эллипса увеличился 0,001 отн.ед., удлиненность на 0,02 отн.ед.

Весьма значительно изменились показатели третьей группы относительно контрольной группы. Так ИНДНК увеличился 1,7 раз, площадь в 2,4 раза, периметр 1,6 раз, диаметр 1,6 раз, фактор формы уменьшился 0,024 отн.ед., фактор эллипса уменьшился на 0,001 отн.ед., удлиненность уменьшилась 0,05 отн.ед.

Рис 1. Динамика изменения ИНДНК в экспериментальных группах. Гистограмма смещается в право, что свидетельствует о нарастании ИНДНК.

Рис 2. Динамика изменения площади ядер гепатоцитов в экспериментальных группах. Гистограмма смещается в право, что свидетельствует о нарастании значения площади.

Рис 3. Динамика изменения фактора формы в экспериментальных группах. Наименьшее значение показателя отмечается сразу после однократного воздействия. Через два дня ежедневной умеренной воздушной гипотермии показатель фактора формы приближается к контрольной группе.

Заключение.

  1. Через два дня воздействия воздушной умеренной гипотермии происходит увеличение морфо и плоидометрических показателей.

  2. Многократная воздушная умеренная гипотермия способствует развитию адаптации организма к гипотермии по всей видимости в этом и заключается эффект закаливания.

Список использованной литературы.

  1. Саперовская В.Е., Халиков А.А. Дифференциальная диагностика смерти от гипотермии и от острого отравления этиловым спиртом по гистологическим признакам/ Медицинский вестник Башкортостана. 2017. Т.12, №6(72). С. 46-50.

  2. Халиков А.А., Саперовская В.Е., Сагидуллин Р.Х. Дифференциальная диагностика смерти от гипотермии и от внезапного проявившихся заболеваний сердца по микроморфологическим признакам/ Медицинский вестник Башкортостана. 2017. Т.12, №6(72). С. 50-56.

  3. Чудаков А.Ю., Божечко А.П., Хрусталева Ю.А., Толмачев И.А. Морфологические признаки смертельной острой общей холодовой травмы на воздухе/Судебная медицина. 2022. Т.8. №3. С.47-55.

  4. Чудаков А.Ю., Толмачев И.А., Хрусталева Ю.А., Божченко А.П. /К вопросу судебно-медицинской диагностики причины смерти от действия низкой температуры в воде. Судебная медицина. 2023. Т.9.№2. С.125-134.

  5. Бобров И.П., Лепилов А.В., Крючкова Н.Г., Долгатов А.Ю., Гулдаева З.Н., Орлова О.В., Шепелева Н.В., Лушникова Е.Л., Бакарев М.А., Молодых О.П. Морфофункциональная характеристика ядер гепатоцитов печени крыс после воздействия гипотермии // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – №6.

  6. Бобров И.П., Лепилов А.В., Гулдаева З.Н., Долгатов А.Ю., Алымова Е.Е., Крючкова Н.Г., Лушникова Е.Л., Молодых О.П. Тучноклеточная инфильтрация легких крыс после гипотермии // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – №1. – [Электронный ресурс].

  7. Бобров И.П., Лепилов А.В., Гулдаева З.Н., Долгатов А.Ю., Алымова Е.Е., Соседова М.Н., Крючкова Н.Г., Орлова О.В., Лушникова Е.Л., Бакарев М.А., Молодых О.П. Морфофункциональная характеристика тучноклеточной популяции легких крыс при однократной и многократной глубокой иммерсионной гипотермии // Современные проблемы науки и образования. – 2019. – №2. – [Электронный ресурс].

  8. Долгатов А.Ю., Бобров И.П., Лепилов А.В., Крючкова Н.Г., Алымова А.А., Лушникова Е.Л., Молодых О.П. Морфофункциональная характеристика тучноклеточной популяции печени белых крыс при глубокой иммерсионной гипотермии (экспериментальное исследование) // Бюллетень медицинской науки. 2018. №3. С. 24-28.

  9. Бульбенко М.М., Корсиков Н.А., Долгатов А.Ю., Лепилов А.В., Бобров И.П., Бабкина А.Н., Долгатова Е.С., Невмержицкая А.И., Раевская В.В., Казарцев А.В. Некоторые особенности структурно-морфологической реорганизации органов эндокринной системы при гипотермических поражениях. Перспективы дальнейшего изучения // Современные проблемы науки и образования. – 2022. - №1. URL:https://science - education.ru /ru /article/viev?id=31471

  10. Бобров И.П., Лепилов А.В., Долгатов А.Ю., Крючкова Н.Г., Бакарев М.А., МолодыхО.П. Влияние среды охлаждения на плоидометрические параметры гепатоцитов белых крыс // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. – 2019 – Т.167, № 2. – С. 163 – 168.

  11. Бульбенко М.М., Корсиков Н.А., Долгатов А.Ю., Лепилов А.В., Бобров И.П., Бабкина А.Н., Долгатова Е.С., Невмержицкая А.И., Раевская В.В., Казарцев А.В. Некоторые особенности структурно-морфологической реорганизации органов эндокринной системы при гипотермических поражениях. Перспективы дальнейшего изучения // Современные проблемы науки и образования. – 2022. - №1. URL:https://science - education.ru /ru /article/viev?id=31471

  12. Долгатов А.Ю., Бобров И.П., Корсиков Н.А., Долгатова Е.С., Бабкина А.В., Лепилов А.В., Лушникова Е.Л., Бакарев М.А. Динамика плоидометрических и морфометрических показателей ядер гепатоцитов человека в зависимости от интенсивности переохлаждения // Современные проблемы науки и образования.-2023.-№4.

Просмотров работы: 5