Биохимия слёз. Зависимость их химического состава от причин возникновения.

Титова А.В. 1

1МАОУ СШ №151

Клименко Н.Б. 1

1МАОУ СШ №151

Работа в формате PDF

3.1 MB

Автор работы награжден дипломом победителя II степени

Диплом школьника Свидетельство руководителя

Текст работы размещён без изображений и формул.
Полная версия работы доступна во вкладке "Файлы работы" в формате PDF

Введение

Очень часто можно услышать фразу: «Слезами горю не поможешь», но так ли это? Ведь слёзы-не редкость в нашей жизни, однако, никто и не задумывается об их назначении, причинах появления и возможном различии в их составе, поскольку слёзы - это не просто солёная вода, это биологическая жидкость, имеющая свои особенности. К сожалению, они всё еще недостаточно изучены, на многие вопросы учёные до сих пор не находят ответов.

Я считаю, что исследование слёзной жидкости - это актуальная тема, которая даст возможность лучше понять устройство нашего организма и показать приоритетные направления для диагностики его состояния.

Цели работы: Выявить зависимость химического состава слезной жидкости от причины возникновения и установить возможность использования слезной жидкости для диагностики состояния организма.

Объект исследования: слезная жидкость

Предмет исследования: химический состав слезной жидкости.

Гипотезы:

Слёзы являются биологической жидкостью организма, следовательно, можно предположить, что они имеют различный химический состав в зависимости от причины их возникновения.

Предполагается, что можно использовать слезную жидкость для диагностики состояния организма.

Задачи:

Провести анализ медицинской, биологической и химической литературы по теме исследования.

Выяснить процесс образования слёз и их функции.

Классифицировать слёзы.

Изучить химический состав слёзной жидкости и его различия в зависимости от типа слёз.

Провести наблюдение за слёзной жидкостью с помощью светового микроскопа.

Провести химические эксперименты для установления свойств слёз и различий в их составе.

Предположить причины, обосновывающие свойства слёз.

Предположить возможность использования слёзной жидкости для диагностики состояния организма.

Проанализировать результаты исследований.

Методы исследования:

Теоретические: Анализ, синтез, индукция, классификация, обобщение.

Эмпирические: химические эксперименты, наблюдение, описание, сравнение, измерение, изучение научной литературы и Интернет-ресурсов по заданной теме, метод количественного и качественного результата исследования, световая микроскопия.

1. Теоретическая часть. Значение слёзной жидкости и различие состава слёз.

Процесс образования слёз.

Слёзный аппарат человека устроен достаточно сложно, он состоит из слезных желез и слезовыводящих путей, слезных канальцев, слезного мешка и носослезного протока.

Слезная железа залегает в верхнелатеральном углу глазницы в ямке слезной железы и выделяет слезу. Также слёзная железа состоит из двух частей: верхней и нижней части. Они разделены широким сухожилием мышцы, поднимающей верхнее веко.

Выводные протоки глазничной части железы открываются в наружной половине верхнего конъюнктивального свода. Кровоснабжается слезная железа слезной артерией, являющейся ветвью внутренней сонной артерией, что говорит о возможной связи между веществами, вырабатываемые в мозге и СЖ. Иннервация слезной железы сложная: чувствительную иннервацию обеспечивает слезный нерв, исходящий из первой ветви тройничного нерва, который присоединяется к Гассерову ганглию, также железа имеет парасимпатические и симпатические нервные волокна. Центр слезоотделения находится во взаимодействии с другими центрами и реагирует на сигналы, поступающие из разных рецепторных зон. [10](приложние №1)

Слеза, поступив из слезных желез в конъюнктивальный мешок, омывает глазное яблоко и собирается в слезном озере.

Слезная жидкость (СЖ) – это многокомпонентный секрет, находящийся в конъюнктивальной полости и постоянно увлажняющий наружную поверхность эпителия роговицы и конъюнктивы. Объем слезы, постоянно находящийся в полости конъюнктивы здорового глаза составляет 6-7 мкл. СЖ равномерно распределена под влиянием сил поверхностного натяжения, гравитации и движения век.

Описывается слезный ручей, что является каналом, образованным наружной поверхностью глазного яблока и передними краями закрытых век. Слеза стекает к слезному озеру. Из слезного озера слеза через слезные канальцы следует в слезный мешок, откуда через носослезный канал, поступает в нижний носовой ход (приложение №2). [18]

Таким образом, слёзная железа выполняет следующие функции:

Оптическая. Увлажняют поверхность роговой оболочки, сглаживает неровности роговицы.

Увлажнение и предотвращение «синдрома сухого глаза», который возникает от усталости и зрительного перенапряжения.

Доставка полезных веществ к роговой оболочке. B частности, лизоцим – это фермент, разрушающий клетки бактерий, и бета-лизин – сывороточный белок, обладающий противомикробной активностью.

Очищение поверхности глазного яблока от загрязнений, полученных извне, пыли, инородных предметов.

Успокоительная. Слезы, выделяющиеся в стрессовых ситуациях или под влиянием эмоций, контролируют резкий выброс гормонов, также содействуют стабилизации психического состояния.

Социальная. Слёзы—это сигнал уязвимости, поэтому они способны вызвать эмпатию у других людей. Таким образом, слёзы являются способом коммуникации.

1.2 Виды слёз. Классификация.

В зависимости от причины возникновения и их функций слёзы можно разделить на несколько типов:

Базальные, которые выделяются постоянно и смягчают роговицу глаза, защищают его от внешних раздражителей: бактерий, пылинок и других инородных тел.

Рефлекторные или механические — это физиологические слезы, которые возникают в результате воздействия раздражителей. Примером может послужить реакция на слезоточивый глаз или на испарения от лука.

Эмоциональные. Они возникают по причине переживания сильных эмоций: большой радости или большой грусти, как реакция на стресс. [7]

Состав слезы.

Слеза здорового глаза является прозрачной бесцветной жидкостью слабощелочной реакции c рН 6,5-7,8. Осмотические характеристики СЖ соответствуют 0,9% раствору хлорида натрия. В состав слезы входит 1-2% неорганических электролитов и органических веществ различной молекулярной массы и химических свойств, остальные 98-99% приходятся на воду [6, 19].

К неорганическим веществам слезы относятся ионы микроэлементов: натрия, хлора, калия, кальция, меди, цинка, железа, марганца, бария, серебра, сурьмы, хрома, стронция и др. Калий и хлор содержатся в СЖ в большем количестве, чем в плазме крови, а остальные микроэлементы в меньшем [8]. Ионы металлов обеспечивают кислотно-щелочное равновесие и осмотический гомеостаз слезы. Они также являются важной составной частью ферментов, местных гормонов и других биологически активных веществ, отвечающих за регуляцию обмена веществ [19].

В органическом составе СЖ преобладают белки. Их основное значение заключается в обеспечении нормальной кислотности и онкотического давления. Они участвуют в иммунологических и ферментативных процессах, обладают бактерицидным и бактериостатическим действием. Общее количество белка базальной слезы составляет 20 г/л. В слезе определено 60 фракций белка, в основном альбумины и глобулины, а также продукты белкового обмена, мочевина и креатинин. Наряду с белками в СЖ содержатся около 20 аминокислот, причем их уровень выше, чем в сыворотке крови в 3-4 раза [19].

Ферментный состав слезы разнообразен и включает в себя такие ферменты, как оксидоредуктазы, трансферазы, гидролазы, синтетазы, дегидрогеназы и др., что указывает на активные метаболические процессы, происходящие в ней. В СЖ также содержатся: липиды, холестерин, холестероиды, триацил-, диацил- и моноацилглицериды, свободные жирные кислоты, фосфолипиды и другие продукты обмена жиров, в концентрациях близких к таковым в плазме крови [5, 6, 9].

Из углеводов и продуктов их обмена основное значение для клиники имеет глюкоза, так как общеизвестна актуальность болезни сахарный диабет. В СЖ здорового глаза содержится 0,1-0,2 ммоль/л [17].

Из всех иммунологических компонентов СЖ наиболее изученными являются защитные факторы, в первую очередь неспецифической резистентности: лизоцим, лактоферрин, церулоплазмин, пропердин, b-лизин, антикомплементарный фактор, фракции комплемента СЗ и С4, простагландины групп Е и F, а также факторы иммунологической реактивности - иммуноглобулины классов A, в том числе и секреторный Аs, D, G, M и Е [1, 3, 16].

К неспецифическим факторам защиты относятся a- и b-сиаловые кислоты, а так же ДНК-аза и гистамин, ингибиторы протеолитических ферментов: a1-антипротеиназа, интер-a1-антитрипсин, a1-антихимотрипсин, a2-макроглобулин. При воспалительных заболеваниях к ним добавляются медиаторы воспаления и белки плазмы крови: трансферрин, С-реактивный белок, гаптоглобин, а также интерферон, серотонин и др. В состав СЖ также входят: медиаторы вегетативной нервной системы-адреналин, норадреналин, ацетилхолин, диоксифенилаланин, дофамин, простагландины групп Е и F, тироксин, трийодтиронин, витамины А, С [2].

В СЖ содержатся компоненты системы гемостаза. Среди них обнаружены a2-макроглобулин, продукты дегадации фибриногена, тромбопластин, активаторы и проактиваторы плазминогена и плазминоген [4]. Наибольшую практическую ценность имеют комплексные, интегральные показатели, по которому можно судить о функциональной активности основных звеньев системы гемостаза. Такой показатель в виде локального фибринолитического потенциала был вычислен и изучен В.В.Никольской и Л.А.Кацнельсоном [13]. Таким образом, СЖ представляет собой поликомпонентную метаболически активную биологическую систему, в которой активно протекают разнообразные метаболические, иммунологические, регуляторные, защитные процессы и многие биохимические реакции.

Итак, химический состав представляет собой: Вода-97,8%, Сухой остаток-2,2%, Белок-20 г/л в базальной слезе и 3-7 г/л в стимулированной слезе. Альбумин-0,5% Липиды-1,96 г/л-м, 2,4 г/л-ж. Соли-1,8% NaCl-1.5%

Свойства слезы:

Плотность-от 1,001 до 1,009, рН-от 6,5 до 7,8-слегка щелочная среда Химический состав слезы аналогичен составу крови, но в отличие от крови в слёзной жидкости больше концентрация калия и хлора, зато органических кислот меньше.

1-липидный слой-толщина 0,11 нм, 2-водянистый слой-толщина 7 нм, 3-муциновый слой-толщина 0,02-0,05 нм.

Вкус слёз:

Слёзная жидкость имеет характерный солёный вкус, что объясняется наличием в его составе большого количества хлорида натрия. Однако солёность слёз варьируется в зависимости от состояния организма. Так, слёзы, вызванные горем, стрессом и, в особенности, жалостью к себе, более солёные, чем слёзы радости. Рефлекторные же слёзы почти не имеют вкуса. Данная закономерность до сих пор недостаточно изучена, однако точно известно, что при плаче щитовидная железа выделяет активные вещества, которые запускают такие процессы, как: увеличение амплитуды сигналов в коре головного мозга, Надпочечники начинают функционировать сильнее обычного, Сердце сокращается чаще. Гормон, выделяемый щитовидной железой, адренокортикотропный гормон, активирует выделение надпочечниками кортизола, облегчающего адаптацию к стрессу. Энкефалин — нейропептид, обладающий болеутоляющим и седативным эффектом. Есть предположение, что со слезами выводятся химические вещества, которые организм вырабатывает в ответ на стресс. [20]

1.4 Кристаллизация слезы. Изучение слёзной жидкости.

Одной из первых публикацией по кристаллизации-статья французских ученых Anton-Francos de Fourcroy и Louis-Nicolas Vauquelin, вышедшая в 1791 году. В ней описывается кристаллизация слезы. Описаны кубические кристаллы, которые аналогичны кристаллам соли из морской воды.

Известный французский химик Антуан де Фуркруа в 1791 году исследовал кристаллизацию капли слезы, сыворотки крови, спинномозговую жидкость, молоко, внутриглазную жидкость. Он высушивал жидкость при комнатной температуре (22-25) градусов и относительной влажности 45-50%. Он выделял две основные области на стагограмме. В периферической области содержится коллоид, альбумин. В центральной области содержатся кристаллы соли. Стагограмма слезы сильно отличается от стагограммы остальных биожидкостей. Например, в центральной области всегда имеется 4-5 блестящих кристалла. Стагограмма слезы взрослого человека отличается от стагограммы ребенка, что отражает различный химический состав.

В начале 20-го века вышли серии книг без указания автора Агни-йога. Агни-йога, или Живая Этика, — синкретическое религиозно-философское учение, объединяющее западную оккультно-теософскую традицию и эзотеризм Востока.

Создателями учения являются Николай и Елена Рерихи. В данном учении содержались следующие слова: «Слезы добрые и слезы дурные – так различал древний Египет. Первые от восторга, от любви, от подвига; вторые от тоски, от злобы, от зависти. Недавно один ученый обратил внимание на различный состав слез в зависимости от импульса. Конечно, каждая секреция совершенно различается в своей сущности, когда противоположные чувства вводят вредные или благие ингредиенты. Но слезы, как очень чистое явление, могут дать особенно полезные наблюдения. Конечно, и такие наблюдения требуют времени и терпения». [12]

В 1986 году Роландо предложил выделить четыре типа кристаллизации (приложение №3) :

тип I = компактная форма без промежуточного пространства;

тип II = некомпактная форма папоротника, меньше кристаллизации, и некоторые места среди кристаллов;

III = кристаллов мало и они маленькие, разделенные в изобилии аморфным пространством, в том числе конгломератами аморфного муцина;

IV = нет кристаллизации.

В 2008 году фотограф Розе-Линн Фишер решила рассмотреть слёзы под микроскопом. Проект получил название «Топография слез». Роза-Линн Фишер изучила образцы слез, которые появлялись у «подопытных» в результате различных эмоциональных состояний. Для эксперимента она использовала микроскоп Zeiss с прикрепленной к нему цифровой фотокамерой. Исследовательница сравнила не только «луковые» слезы, те, что появляются от радости и горя, а также «мужские» и «женские». Она пришла к выводу, что причина слез играет немаловажную роль в том, какой структурой обладают молекулы жидкости. [14] (приложение № 4-5)

Кристаллография слезы использовалась для диагностики следующих заболеваний:

-локализация злокачественных образований,

-различных формах дистрофической патологии глаз,

-контроля эффективности проводимого лечения при различных формах патологии глаз.

1.5 Возможности использования слёзной жидкости для диагностики организма.

Из всего вышесказанного понятно, что слёзная жидкость, как и другие биологические жидкости, несёт в себе важную информацию, отражает состояние организма. Поэтому возможно её использование при нахождении патологий, в особенности это ценно для офтальмологии.

Методы получения СЖ влияют на ее состав (химическая, механическая, эмоциональная). Повышают секрецию СЖ аммиак, лук, бромгексин, хлорацетофенон и др., уменьшают ее ганглиоблокаторы, психотропные и снотворные средства, (3-блокаторы).

Белки и другие азотсодержащие соединения.

Белки в СЖ в основном секретируют слезные железы. Наибольшие изменения содержания белка и баланса белковых фракций в СЖ наблюдаются при воспалительных заболеваниях переднего отрезка глаза. После химического ожога роговицы или УФ облучения глаза уровень общего белка в СЖ повышается в 1,5-2 раза. После экстракции катаракты и при ношении жестких контактных линз содержание общего белка также умеренно повышается. При вирусном кератите и конъюнктивите, ирите и иридоциклите резко уменьшается количество альбуминов слезного происхождения. При бактериальном конъюнктивите, УФ облучении и ожоге щелочью происходит наоборот.

Воспалительный процесс в глазу сопровождается повышением концентрации Ig A, G и М в слезе. В диагностике вирусных заболеваний роговицы имеет значение определение показателей местной иммунной системы.

Ферменты.

Активность многих ферментов в СЖ, собранной фильтровальной бумагой из конъюнктивального мешка, значительно выше, чем в стимулированной СЖ, осторожно собранной микрокапилляром. Это подтверждает, что источники указанных ферментов глазные ткани, а не слезная железа, и для них формируется барьер кровь — слеза, препятствующий их проникновению из крови в СЖ. Эластаза СЖ — показатель воспалительного процесса в глазу. Повышение ее активности можно объяснить резким увеличением числа эмигрировавших в СЖ полиморфноядерных лейкоцитов. При язве роговицы активность эластазы СЖ увеличивается в 15 раз по сравнению с контролем. В СЖ больных с саркоидозом повышена активность ангиотензинпревращающего энзима. Активность лизосомных гидролаз в СЖ в 2 10 раз выше, чем в сыворотке крови. Роговица и конъюнктива могут быть дополнительными источниками лизосомных ферментов СЖ после травмы этих тканей.

Гормоны, медиаторы, витамины.

В стимулированной СЖ, собранной микрокапилляром, обнаружены адреналин, норадреналии, дофамин. При глаукоме их содержание уменьшается. Трийодтиронии переходит в СЖ из плазмы кров в 20 раз быстрее, чем тироксин. При гипертиреозе это соотношение не изменяется. Уровень гистамина в СЖ повышен при конъюнктивите.

Вода и неорганические вещества.

При бактериальном конъюнктивите повышается содержание этих катионов, при вирусном кератите увеличивается количество Na, а при иридоциклите снижается уровень 5 перечисленных элементов. У детей с фиброзным циститом повышено содержание Са в СЖ.

Лекарственные препараты.

Обнаружение Li в СЖ представляет интерес, так как препараты Li купируют острое маниакальное возбуждение у психических больных и предупреждают аффективные приступы. Пенициллин, эритромицин и большое число других антибиотиков легко выявляются в СЖ, что позволяет избежать лишнего взятия крови, а, значит, ограждает от многих рисков: заражение СПИДом, обмороки, боязнь взятия крови. [11]

В 2006-2007 году был изобретен новый способ диагностики организма и выявления патологий: СЖ человека замораживают в небольших количествах до температуры ниже минус 5 градусов по Цельсию и на предметном стекле исследуют под микроскопом информационную структуру образовавшихся кристаллов СЖ. Структура образовавшихся кристаллов СЖ несёт информацию о состоянии биологического организма. На основании этой информации исследуют состояние организма. Такой метод не требует вмешательства в организм, что гарантирует влияние от внешних воздействий при анализе.

В 1991г был подан патент на способ определения локализации злокачественных новообразований. Использование: в области медицины, в частности в онкологии. Сущность изобретения: в кристаллограмме слезы определяют количество мелких игольчатых кристаллов, располагающихся между более крупными различной формы. При их количестве 8 и менее диагностируют злокачественное новообразование в органах зрения, 15-120 - в области шеи или головы, а более 150 - в легких или желудочно-кишечном тракте. (приложения № 6-8) Способ позволяет осуществляет более точную диагностику локализации злокачественных новообразований. [15]Все больные прооперированы, диагноз подтвержден гистологически.

2. Исследование свойств и химического состава слёзной жидкости.

2.1 Подготовка исследования.

Исследование слёзной жидкости проводилось мною осенью-зимою 2019 года и включало в себя несколько этапов:

Сбор материал для исследования.

Исследование СЖ в школьной лаборатории при помощи разнообразных способов: световая микроскопия и химический эксперимент.

Анализ полученных результатов и подведение итогов.

2.2 Сбор материала для исследования.

Для изучения СЖ мне понадобились слёзы двух типов: рефлекторные, собранные от действия раздражителя-испарения лука, и эмоциональные, полученные в результате переживания сильных эмоций. Для чистоты эксперимента я повторила каждый из опытов, используя слёзы двух разных людей.

2.3 Первый эксперимент, определение среды СЖ.

Для этого опыта мне понадобились:

1.Слёзы. (рефлекторные и эмоциональные).

2. Раствор фенолфталеина, раствор метилового оранжевого.

Действия:

1.Я прилила к 1 мл слёз пару капель раствора фенолфталеина. Видимых изменений не наблюдала. (приложение №9)

2. Я прилила к 1 мл слёз раствор метиловый оранжевый. Жидкость окрасилась в жёлто-оранжевый цвет. (приложение №10)

Рисунок №7 - изменение окраски раствора метилового оранжевого в СЖ.

2.4 Второй эксперимент. Изучение кристаллизации слёз.

Действия:

1.Я рассматривала высохшие слезы, применяя метод световой микроскопии. (Приложения №11-23)

Кристаллы слёз разных типов сильно отличаются друг от друга: эмоциональные слёзы образуют длинные, разветвлённые и красивые кристаллы со сложным рисунком. Рефлекторные слезы образуют маленькие кристаллы, похожие на морозные узоры. Расстояния между ними большие.

2.5 Третий эксперимент. Определение содержания белка в слёзной жидкости.

Для проведения этой реакции я собрала эмоциональные и рефлекторные слёзы, а для обнаружения белка использовала качественную Биуретовую реакцию.

Реактивы:

1. 10 %-го раствора гидроксида натрия.

2. 1 %-ый раствор сульфата меди.

Действия:

К 1 мл слёзной жидкости приливаю 1 мл раствора NaOH, затем добавляю 5 капель CuSO4, аккуратно перемешиваю.

Вижу, что содержимое пробирки приобретает фиолетовый цвет. (приложения № 24-25)

Заключение:

На основании исследования кристаллизации слёзной жидкости методом световой микроскопии и проведении химических экспериментов, а также изучении научной литературы, я сделала несколько выводов:

В слёзной жидкости нейтральная или слегка щелочная среда. Это можно объяснить наличием ионов и солей щелочных металлов, содержащихся в растворе, который в свою очередь в основном состоит из воды. Таким образом, слёзная жидкость является универсальной средой для проведения физико-химических реакций.

Слёзная жидкость имеет сложный состав, который меняется в зависимости от причин её возникновения.

Кристаллизация типов слёз отличается друг от друга, что объясняется различием в химическом составе.

В слёзной жидкости содержится огромное количество белков, в особенности в эмоциональных слезах. Так, в случае рефлекторной слезы при проведении Биуретовой реакции, интенсивность ее цвета была слабее. Так как гормоны имеют белковую структуру, можно предположить, что при эмоциональных слезах гормоны «выводятся» из организма. К примеру, кортизол, или его ещё называют «гормон горя», который образуется в гипофизе.

Состав слезы постоянно меняется, особенно при воспалительных процессах глаза, что представляет особый интерес для офтальмологии. Также при использовании биохимического анализа слезы и её кристаллографии можно получить достаточно точную информацию о состоянии организма.

Список использованных источников.

Buckley R. J. Vernal keratoconjunctivitis // Intern. Ophthalmol. Clin.-1988.Vol.28. -N4. -P. 303-308.

Gland B., Jensen O., Krogh E., Birgens H. Prostaglandin E level in tears during postoperative inflammation of the eye // Acta ophthalmol. 1985. Vol. 63. N4. P. 375-379.

Miglior M., Troino P. Lacrimal film pathologies: classification and rationale of the therapy // Lacrimal system. -Amsterdam, Milano, New York, 1995. - P. 204.

Tervo T., Tervo K. et all. Plasminogen activator and its inhibitor in the experimental corneal wound // Exp. Eye Res. - 1989. Vol. 48. N3. - P. 445-449.

Van Haeringen N. J., Van Agtelal E. J. Fibrinolytic activity in human tears // Exp. Eye Res. 1989. - Vol. 48. - N3. - P. 461-462.

Бржеский В. В. Слезная жидкость в диагностике некоторых повреждений и заболеваний глаз: Автореф. дис.... к. м. н. - Л., 1990. - С. 23

Видеоролик, взятый из конференции TED. (https://www.ted.com/talks/alex_gendler_why_do_we_cry_the_three_types_of_tears) (дата обращения: 10.01.2019)

Винецкая М. И., Иомдина Е. Н. Исследование микроэлементов в слезной жидкости при некоторых глазных заболеваниях // Вест. офтальмол. - 1994. Т. 110. - №4. - С. 24-26.

Даниличев В. Ф. Патология глаз. Ферменты и ингибиторы. - СПб. - 1996. - С. 240.

Ерошевский Т.И. Глазные болезни: учебное пособие (под ред. Нестерова А.П., Малова В.М.). Москва, 2008.стр 44.

Журнал Вопросы медицинской химии том 36 выпуск 3 1995, стр 13-18

Краевой С.А., Колтовой Н.А. «Книга 4. Кристаллизация различных биожидкостей.» Москва : РТ-Биотехпром, 2013 http://doc.knigi-x.ru/22meditsina/516988-3-kniga-kristallizaciya-razlichnih-biozhidkostey-kraevoy-sergey-aleksandrovich-koltovoy-nikolay.php (дата обращения: 10.01.2019)

Никольская В. В. Патогенез, клиника и лечение гипертонических тромбозов вен сетчатки: Дис.... д. м. н. М., 1986. - С. 378.

Официальный сайт проекта Розе-Линн Фишер «The Topography of Tears» http://www.rose-lynnfisher.com/tears.html

Патент на изобретения метода исследования https://yandex.ru/patents/doc/RU2080596C1_19970527 (дата обращения: 10.01.2019)

Петрович Ю.А., Терехина Н.А. Биохимия слезы и ее изменения при патологии: // Вопр. мед. химии. - 1990. Т.36, вып. 3. - С.18.

Петрович Ю.А., Терехина Н.А. Биохимия слезы и ее изменение при патологии // Вопросы мед. химии. - 1990. - №3. - С. 13-19.

Русский медицинский журнал, РМЖ «Клиническая Офтальмология» №4 от 15.11.2004 стр. 138, Авторы: Мошетова Л.К. 1 , Волков О.А. (https://www.rmj.ru/articles/oftalmologiya/Sovremennoe_predstavlenie_o_sleznoy_ghidkosti_znachenie_ee_v_diagnostike/#ixzz6FYIpk1Kf) (дата обращения: 10.01.2019)

Сомов Е. Е., Бржеский В. В. Слеза. - СПб., Наука, - 1994. - С. 156.

Статья, взятая с интернет-ресурса https://medana-st.ru/raznoe/pochemu-slezy-solenye.html (дата обращения: 10.01.2019)

Приложение №1

Основание головного мозга и корешки черепных нервов.

Приложение №2

Строение слёзных органов.

Приложение №3

4 типа кристаллизации

Приложение №4

Сострадание

Приложение №5

Слёзы восторга в решающий момент

Приложение №6

Кристаллограмма слезы больного В. 64 лет с диагнозом рак желудка.

Приложение №7

Кристаллограмма слезы больного А. 56 лет с диагнозом рак гортани.

Приложение №8

Кристаллограмма слезы больной Ф. 56 лет с диагнозом меланома хориоидеи.

Приложение №9

Изменение окраски фенолфталеина в СЖ не наблюдается.

Приложение №10

Изменение окраски раствора метилового оранжевого в СЖ.

Приложение №11

Рост кристаллов рефлекторной слезы.

Приложение №12

Рост кристаллов рефлекторной слезы.

Приложение №13

Рост кристаллов рефлекторной слезы.

Приложение №14

Рост кристаллов рефлекторной слезы

Приложение №15

Рост кристаллов рефлекторной слезы.

Приложение №16